Testarea prenatală neinvazivă pentru aneuploidii fetale – trisomii, microdeleții, boli monogenice (Veragene)

Informații generale și recomandări

Testul VERAgene este un test prenatal non-invaziv (NIPT) de nouă generație, dezvoltat în laborator care oferă screening pentru trisomiile 13, 18, 21, aneuploidiile cromozomilor X, Y, microdeleții (DiGeorge, 1p36, Smith-Magenis, Wolf Hirschhorn) și identificarea riscului fetal pentru 100 de boli monogenice. VERAgene vizează 2000 de mutații pentru depistarea a 100 de boli monogenice. Combinând depistarea aneuploidiilor și a microdelețiilor cu screeningul bolilor monogenice, acest test oferă o imagine complexă a sarcinii folosind un singur test.

Afecțiunile genetice depistate de VERAgene sunt de multe ori grave și au un impact semnificativ asupra calității vieții. Aceste afecțiuni genetice se manifestă prin: malformații congenitale, întârzieri de dezvoltare, pierderea auzului, orbire, tulburări de metabolism etc.

Riscul cumulativ pentru ca fătul să fie afectat de una dintre bolile genetice depistate de VERAgene este mai mare de 1 din 350 și ar putea crește la unele populații etnice unde anumite boli au o prevalență mai mare. Testul VERAgene poate depista cu precizie aceste boli pentru a ajuta părinții să ia decizii în cunoștință de cauză în legătură cu posibilele tratamente și managementul clinic.

ADN-ul fetal liber circulant ce reprezintă aproximativ 3-13% din ADN-ul matern liber total, derivă probabil în mare parte din placentă și dispare în decurs de câteva ore după nașterea fătului¹. Testul VERAgene utilizează ADN-ul fetal liber izolat din sângele mamei împreună cu proba de ADN a tatălui pentru a depista anumite potențiale mutații genetice cu ajutorul tehnologiei și bioinformaticii brevetate, de ultimă generație.

Testul este disponibil pentru sarcinile monofetale și gemelare, inclusiv cele obținute prin fertilizare in vitro (FIV) la cel puțin 10 săptămâni de gestație. Sarcinile gemelare cu sindromul geamănului dispărut sunt eligibile pentru testarea după săptămâna a 10-a de gestație și la 4 săptămâni după dispariția unuia dintre embrioni. Sarcina gemelară și cea cu pierderea unui făt (sindromul geamănului dispărut) nu este eligibilă pentru detectarea aneuploidiilor cromozomilor X și Y⁶.

CARE SUNT AFECȚIUNILE PENTRU CARE SE REALIZEAZĂ SCREENINGUL CU VERAgene?

Pentru lista completă a celor 100 de boli monogenice depistate de VERAgene, vă rugăm accesați: www.nipd.com/veragene100.

Investigația fiind non-invazivă evită riscul unui avort și infecție intrauterină asociat cu testarea prenatală invazivă (prin amniocenteză sau prelevarea de vilozități coriale) iar detectarea aneuploidiilor fetale permite intervenția precoce⁶.

Recomandări de testare

• Vârsta maternă mai mare de 35 de ani
• Evidențierea unui risc crescut de anomalii cromozomiale în urma screening-ului efectuat prin dublu sau triplu test
• Ecografia fetala anormală
• Nașterea anterioară a unui copil cu anomalii cromozomiale
• Fertilizare in vitro
• Paciente cu contraindicație pentru metodele invazive de diagnostic prenatal
• Istoric familial pozitiv pentru anomalii cromozomiale sau boli monogenice (dintre cele testate)^1;6

Pregătire pacientă:

Se recomandă ca medicul trimițător să efectueze o consiliere corespunzătoare pretestare.

Pacienta trebuie să prezinte o ecografie care să facă dovada vârstei gestaționale.

Testul poate fi efectuat între săptămâna a 10-a** și săptămâna a 24-a de sarcină. Se recomandă ca medicul trimițător să furnizeze informații ecografice detaliate care estimează săptămânile de sarcină, în special pentru sarcina incipientă. ^6;8

Înaintea recoltării probei pacientele vor completa obligatoriu 1 formular ce conține: formular informații probă, acordul pacientului informat, nota de informare privind prelucrarea de date cu caracter personal (ce includ informații despre utilitatea testării neinvazive prenatale, precum și limitele acesteia).

În vederea recoltării probei nu este necesară o pregătire specială. Datorită particularităților sistemului de recoltare aceasta se va efectua însă numai la sediile Synevo.

Specimen recoltat – sânge venos de la mama si tampon bucal de la tatăl biologic⁷.

Recipient de recoltare – vacutainer Streck-Cell-Free BCT și tampon bucal prezente în kitul de recoltare⁷.

Prelucrare necesară după recoltare – pentru a asigura optima omogenizare a sângelui efectuați 10 mișcări ușoare de inversiune a tubului⁷.

Stabilitate probă – în vederea asigurării stabilității probei până la sosirea în laboratorul unde se efectuează testarea, proba va fi menținută la temperaturi de 6 – 24°C, în cutia originală⁷.  Stabilitatea probei este de  max. 4 zile.

Dacă proba se recoltează la centrele din țară aceasta trebuie să ajungă în 24h la Laboratorul Central.

Interpretarea rezultatelor

Prin acest test se evaluează trisomiile 13, 18, 21, dar este, de asemenea, posibil să se raporteze și alte aneuploidii cromozomiale sau sindroame de microdeleție (22q11.2, 1p36, 17p11.2, 4p16.3). În plus, testul VERAgene este singur test NIPT care evaluează și boli monogenice ale fătului cu efecte severe. Rata de detecție a acestor anomalii este apropiată, dar nu egală cu 100%.

Un rezultat „risc înalt” (pozitiv) pentru o anumită condiție genetică dintre cele analizate indică faptul că există o mare probabilitate (>99.9%) ca fătul să fie afectat de boala genetică respectivă. Deoarece VERAgene nu este un test diagnostic, un rezultat pozitiv trebuie confirmat printr-un test de diagnostic prenatal din lichid amniotic sau vilozități coriale.

Deși rata de detecție este foarte mare un rezultat „risc scăzut” (negativ) nu poate exclude în totalitate posibilitatea unei afecțiuni genetice fetale.

În ceea ce privește detecția aneuploidiilor cromozomilor sexuali acuratețea testului este de >99%^6;7.

Limite și interferențe

Pentru sarcinile gemelare acuratețea rezultatelor pentru trisomiile 13,18 și 21 este de >99%. Dacă rezultatul este „risc înalt”, se sugerează că cel puțin unul dintre fetușii gemeni are un risc crescut și este nevoie de investigare suplimentară a ambilor fetuși.

În cazul în care gravidei i s-au efectuat transfuzii cu sânge, transplant sau terapie cu celule stem, există posibilitatea obținerii unui rezultat fals din cauza ADN-ului exogen.

Testele VERAgene nu pot evidentia:

• translocații cromozomiale echilibrate și alte anomalii cromozomiale structural decât cele menționate mai sus
• poliploidii
• mozaicisme cromozomiale fetale și/sau placentare în procent mic (adică prezența a două linii celulare cu un set diferit de cromozomi, cu o linie celulară slab reprezentată)
• defecte de metilare a ADN-ului^6;7.

Bibliografie

1. The American College of Obstetricians and Gynecologists. The Society for Maternal-Fetal Medicin. Commitee Opinion: Noninvasive Prenatal Screening for Fetal Aneuploidy. Number 545, December 2012. www.acog.org.
2. Lo YMD, Corbetta N, Chamberlain PF, Rai V, Sargent IL, Redman CWG, Wainscoat JS. Presence of fetal DNA in maternal plasma and serum. Lancet 1997; 350:485-487
3. SmidM, Lagona F, de Benassuti L, Ferrari A, Ferrari M, Cremonesi L. Evaluation of different approaches for fetal DNA analysis from maternal plasma and nucleated blood cells. Clin Chem1999;45:1570-1572.
4. Houfflin-DebargeV, O’Donnell H, Overton T, Bennett PR, Fisk NM. High sensitivity of fetal DNA in plasma compared to serum and nucleated cells using unnested PCR in maternal blood. Fetal Diagn Ther 2000;15:102-107.
5. Lo YMD. Fetal DNA in Maternal Plasma: Biology and Diagnostic Applications. Clin Chem. 2000 Dec;46(12):1903-6.
6. https://www.nipd.com/veragene/
7. Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.