Recoltam analize medicale la domiciliu. Pentru programare -
079 904 000

Корзина

Nu puteti adauga alte teste in cos. Cosul contine testul PCR COVID-19 care se achita separat.

Continuati
logo logo logo logo
Медицинская информация

Статьи

Болезнь Лайма и лабораторная диагностика

Болезнь Лайма - мультисистемное заболевание, которое возникает после укуса клеща, инфицированного Borrelia Burgdorferi.

Изучение антигенных различий между штаммами, выделенными в Америке и Европе, позволило доказать причастность к патологии человека трех генотипов, составляющих комплекс Borrelia Burgdorferi sensu lato: Borrelia burgdorferi sensu stricto (включающий все штаммы, выделенные в Северной Америке), B. garinii и B. afzelii. В Европе циркулируют все три генотипа, но преобладают B. garinii и B. afzelii.

Диагноз болезни Лайма часто устанавливается путем клинического распознавания мигрирующей эритемы (РС) на первой стадии инфекции. Если она отсутствует, атипичена или нераспознана, необходимы другие методы для уточнения диагноза.

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Лабораторный диагноз помогут выставить:

Прямая микроскопия с визуализацией спирохет

Посев

Молекулярные методы

Серологические реакции

Тест лимфоцитарной трансформации

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Прямая микроскопия

- это метод, который чаще используется для выявления видов Borrelia, вызывающих рецидивирующую лихорадку (B. recurrentis, B. hispanica, B. caucasica). Borrelia Burgdorferi можно визуализировать на срезах тканей после окрашивания серебряной импрегнацией. Количество спирохет в крови у пациентов с болезнью Лайма обычно ниже микроскопического предела.

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Посев

он трудоемок и дорог, часто в пределах компетенции справочных лабораторий. К культивированным патологическим продуктам относятся: кровь, кожа, спинномозговая жидкость, синовиальная жидкость или даже клещ, вызвавший укус. Наиболее часто используемой культуральной средой является среда BSK II (Barbour-Stoenner-Kelly), инкубируемая при 30-33 ° C, при микроаэрофилии, позитивность контролируется микроскопией на темном фоне в течение не менее 4-6 недель.

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Рекомендуемые патологические образцы при лабораторной диагностике болезни Лайма различаются в зависимости от стадии заболевания:

Клинические проявленияПрямое обнаружение с помощью ПЦР или посеваНепрямое обнаружение через антитела
СТАДИЯ 1
(через несколько дней-недель после укуса клеща)
МЭ - Биопсия кожиСыворотка
СТАДИЯ 2
(через несколько недель - месяцев после укуса клеща)
МЭ распространенная - биопсия кожи
Кардит - эндомиокардиальная биопсия
Нейроборелиоз - СМЖ
Сыворотка
Сыворотка
Парно сыворотка\ спинномозговая жидкость
СТАДИЯ 3
(через несколько месяцев - годы после укуса клеща)
Артрит - синовиальная жидкость
ACA - Биопсия кожи
Хронический нейроборрелиоз - СМЖ
Сыворотка
Сыворотка
Парно сыворотка\ спинномозговая жидкость
Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Молекулярные методы

основаны на усилении определенной области бактериального генома. У них более высокая чувствительность, чем у культур для биопсии, крови и суставной жидкости, в отличие от спинномозговой жидкости и мочи, где результаты исследований были неудовлетворительными . Есть лаборатории, которые используют эту технику для извлечения генетического материала боррелий непосредственно из клеща, вызвавшего укус, с указанием того, был ли он инфицирован или нет. Отрицательный результат не исключает заражения боррелиями, а положительный результат вне клинического контекста не подтверждает диагноз.

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Чувствительность метода ПЦР - ДНК боррелий:

ОбразецЧувствительность%
Биопсия кожи (EM и ACA)50 – 70
СМЖСтадия 1- 60
Стадия 2- 30
Биопсия суставов50 – 70
Кровь< 10
Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Серологические реакции

выявляет специфические антитела против боррелий типа Ig.M и Ig.G и являются наиболее часто используемыми тестами для диагностики болезни Лайма.

Чтобы повысить точность серологических результатов, CDC (Центры по контролю и профилактике заболеваний) с 1994 года предложил двухэтапный диагностический алгоритм.

• На первом этапе используется тест EIA (иммуноферментный анализ) или IFA (иммунофлуоресцентный анализ). Эти тесты имеют повышенную чувствительность, что дает уверенность в том, что при отрицательном результате вероятность того, что человек заболеет, очень мала.
У пациентов с подозрением на болезнь Лайма в начальной фазе заболевания с отрицательными серологическими исследованиями выявление инфекции может быть получено путем парного анализа сывороток, взятых в остром периоде и в период выздоровления. Если результат этого этапа положительный или неопределенный (сомнительный), перейдят ко второму этапу, чтобы подтвердить результат.
• Второй этап - выполнить Вестерн-блоттинг. Этот тест имеет высокую специфичность, что означает, что он будет положительным только у действительно инфицированных людей.
В результатах Western blot указывают: положительно или отрицательно. Если результат отрицательный, но есть подозрение на болезнь (сбор образца был проведен слишком рано), рекомендуется повторить анализ через несколько недель.
Для диагностики нейроборелиоза рекомендуется обнаружение интратекального образования антител против боррелий. Это делается путем парного тестирования спинномозговой жидкости и сыворотки, полученных в тот же день. Наличие более высокого титра антител в спинномозговой жидкости, чем в сыворотке крови, устанавливается путем расчета индекса и подтверждает диагноз нейроборелиоза.

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Чувствительность метода Western blot при обнаружении антител IgM и IgG в зависимости от стадии заболевания:

Стадия заболеванияЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬАНТИТЕЛА
И20 – 50 %Преобладание IgM
II70 – 90 %Присутствуют оба класса IgM и IgG
III90 – 100 %Часто только IgG
Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Пределы и ограничения серологических тестов

Ложноотрицательные результаты могут быть получены, если тестирование проводится в начале заболевания, а титр антител остается низким. Антибактериальная терапия, проводимая на первой стадии инфекции, на ранней стадии, может подавить выработку антител. У людей с ослабленным иммунитетом и беременных женщин полученные результаты трудно интерпретировать.
Ложноположительные результаты могут быть получены у пациентов с другими заболеваниями, вызванными спирохетами (сифилис, возвратная лихорадка, лептоспироз), аутоиммунными заболеваниями. К положительным результатам пациентов, которым в последние месяцы делали переливание крови, рекомендуется относиться с осторожностью.
При болезни Лайма необходимо использовать лабораторный диагноз для подтверждения клинического диагноза, основанного на клинических данных и анамнезе.
Диагностика болезни Лайма остается проблемой в клинически неоднозначных случаях с неопределенной серологией и отрицательной ПЦР.
Эти случаи вызвали интерес исследователей, которые в 1990-х годах разработали новый метод, использующий специфический иммунный ответ организма:

Boala Lyme și diagnosticul de laborator - Synevo
Тест лимфоцитарной трансформации

Метод был одобрен в Европе и используется для диагностики инфекционных агентов, лекарственной аллергии или пищевых продуктов. Тест основан на принципе деления лимфоцитов, индуцированного контактом со «специфическим» антигеном. Положительная реакция на LTT ​​свидетельствует о существовании антиген-специфических лимфоцитов (клеток памяти) в крови пациента. Интенсивность LTT-реакции оценивают с помощью индекса стимуляции (SI). Положительный результат теста LTT ​​показывает текущее воздействие на иммунную систему патогена и, следовательно, активную инфекцию. После лечения антибиотиками значения SI снижаются или реакция LTT становится отрицательной, что представляет собой важный инструмент для мониторинга эффективности терапии.

Медицинские анализы, доступные в лабораториях Synevo:

Библиография:

  1. Bettina Wilske, Barbara J. B. Johnson, and Martin E. Schriefer. Borrelia In:Patrick R. Murray et al. – “Manual of Clinical Microbiology, 9th ed. , 2007 , 62: 971- 986.
  2. Betty A. Forbes, Daniel S. Sahm, Alice S. Weissfeld. The Spirochetes.In Diagnostic Microbiology, Twelfth Edition, 2007, 48: 533–541.
  3. Elizabeth Valentine-Thon, Karsten Ilsemann, Martin Sandkamp A novel lymphocyte transformation test (LTT-MELISA®) for Lyme borreliosis. In Diagnostic Microbiology and Infectious Disease, Volume 57, Issue 1, January 2007, Pages 27-34
  4. Maria E. Aguero-Rosenfeld. Detection of Borrelia burgdorferi Antibodies. In Clinical Microbiology Procedures Handbook, AMS, 2007; 11.6.1.
  5. P. Rocco La Sala, Michael B. Smith. Spirochete Infections. In Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Twenty-First Edition, 2007,58, 1059- 1074.
  6. Koneman’s, Spirochetal infections. In: Color atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, Sixth Edition, 2006, 20: 1125-1150.
  7. Volker von Baehr, Christa Liebenthal, Brita Gaida, Frank- Peter Schmidt, Rudiger von Baehr und Hans-Dieter Volk. Evaluation of the diagnostic significance of the lymphocyte proliferation test in patients with Lyme borreliosis. In J Lab Med, 2007; 31(3).
  8. www.mayomedicallaboratories.com. Test Catalog. Lyme Disease Antibody, Western Blot,Serum. Ref Type: Internet Communication, 2010.
icon-cart

Товар добавлен в корзину

Cumpărate frecvent împreună