Антитела к рецептору фосфолипазы А2

Аутоантитела IgG, направленные против рецептора фосфолипазы А2 (анти-PLA2R), представляют собой маркер с высокой специфичностью для мембранной нефропатии 1.

Мембранная нефропатия - это редкое воспалительное заболевание почечных клубочков, характеризующееся отложением иммунных комплексов в базальной мембране клубочков, что приводит к измененной проницаемости клубочковых капиллярных петель, что приведет к протеинурии и часто нефротическому синдрому 1; 2. По мере прогрессирования заболевания утолщение базальной мембраны клубочков можно наблюдать под оптическим микроскопом, отсюда и первоначальное название мембранного гломерулонефрита 2.

Ежегодная заболеваемость в Северной Европе составляет 5–10 случаев на 1 миллион человек. Примерно 20% случаев нефротического синдрома у взрослых вызваны мембранозной нефропатией. Эволюция этого состояния является переменной; около одной трети пациентов будут прогрессировать до терминальной стадии почечной недостаточности в течение 10 лет, другая треть будет иметь хроническую протеинурию и симптомы нефротического синдрома, а у третьей - спонтанную ремиссию2.
Мембранная нефропатия может возникать из-за ряда клинических состояний, наиболее важными из которых являются инфекции (гепатит B, гепатит C, сифилис, малярия), аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, буллезный пемфигоид), новообразования и токсические явления. (нестероидные противовоспалительные препараты, золото, ртуть, пеницилламин) 3.

Мембранная нефропатия, возникающая независимо от других клинических синдромов, является первичной мембранной нефропатией 1. Считается, что 85% мембранных нефропатий являются первичными, а остальные 15% - вторичными 4. Первичная нефропатия у мужчин, возрастная группа 40-70 лет, HLA-DQA15 были связаны с первичной мембранной нефропатией.

Первичная мембранная нефропатия была классически описана как идиопатическая, потому что целевой антиген был неизвестен. В 2009 году исследовательская группа под руководством Дэвида Дж. Саланта обнаружила гликопротеин в 185 кДа в качестве основного антигена, против которого нацелены аутоантитела, присутствующие у 70-80% пациентов с первичной мембранной нефропатией. При анализе методом масс-спектрометрии гликопротеин был идентифицирован как рецептор М-типа для фосфолипазы А2 (PLA2R) 6.

PLA2R экспрессируется на поверхности подоцитов и взаимодействует с фосфолипазой А2. Предполагается, что связывание аутоантител с PLA2R приводит к образованию иммунных комплексов in situ в области базальной мембраны клубочков, которые будут запускать локальную активацию комплемента с избыточной продукцией коллагена IV типа и ламинина. Разрушение цитоскелета повлияет на подоциты, что приведет к изменению фильтрующей функции клубочка и появлению протеинурии 7; 8.

Антитела против PLA2R имеют преимущественно тип IgG4. На практике их определение имеет в качестве основной полезности дифференциацию первичной мембранной нефропатии от вторичных форм заболевания, что также влияет на терапевтическую стратегию 9. В то время как лечение пациентов с вторичной мембранной нефропатией сосредоточено на лечении основного заболевания, пациентов с первичной мембранной нефропатией обычно лечат иммунодепрессантами. Следует отметить, однако, что небольшой процент пациентов с вторичной мембранной нефропатией может быть положительным в отношении анти-PLA2R. Клиническое значение этого открытия неясно; присутствие анти-PLA2R может быть простым совпадением, или они могут играть определенную роль в развитии и прогрессировании заболевания 2.

Показано, что сывороточные уровни антител против PLA2R коррелируют с клинической активностью заболевания, равно как и уровень протеинурии, а также имеют прогностическую ценность 4. Таким образом, у пациентов с низким уровнем анти-PLA2R почечная недостаточность регистрируется реже, а у пациентов с высоким уровнем спонтанная ремиссия встречается очень редко. Кроме того, пациентам с высоким уровнем антител требуется более частая иммуносупрессивная терапия по сравнению с пациентами с низким уровнем. Кроме того, было обнаружено, что антитела коррелируют с ответом на иммуносупрессивную терапию. В нескольких исследованиях сообщалось о снижении уровней анти-PLA2R у пациентов, получающих иммунодепрессанты, в то время как во время рецидива их уровни увеличиваются. Последние данные свидетельствуют о том, что уровень анти-PLA2R в конце терапии имеет прогностическое значение для последующей эволюции 2.

Мембранная нефропатия рецидивирует примерно у 40% пациентов, перенесших пересадку почки. Выявление повышенных уровней анти-PLA2R перед трансплантацией повышает риск рецидива заболевания 2; 4.

Рекомендации по определению антител к рецепторам анти-фосфолипазы А2:

• дифференциация первичной от вторичной мембранной нефропатии;
• мониторинг развития первичной мембранной нефропатии и реакции на лечение;
• оценка риска рецидива заболевания у пациентов, которые получат пересадку почки 9.

Подготовка пациента - специальная подготовка не требуется 10.
Материал - венозная кровь 10.

Транспортная среда, пробирка - вакуумный без антикоагулянта, с / без сепаратора гель 10.
Обработка требуется после сбора материалa - сыворотка отделяется центрифугированием; свежая сыворотка обработана; если это невозможно, сыворотка хранится при 2-8 ° C 10.
Объем образца - минимум 1 мл сыворотки 10.
Причины отказа от пробы
- сильно гемолизированный или липемический образец 10.
Стабильность образца - отделенная сыворотка стабильна в течение 7 дней при 2-8 ° С 10.
Метод - непрямая иммунофлюоресценция ; тест использует трансфицированные клетки, экспрессирующие PLA2R10 на поверхности в качестве субстрата.

Референтные значения и интерпретация результатов

Результаты выражены в виде заголовка.
<1/10: отрицательный.
Титр антител можно использовать при мониторинге заболеваний. Увеличение / уменьшение титра или исчезновение антител обычно предшествует изменению клинического статуса 4.

Результаты этого теста должны быть подтверждены другой клинической информацией (симптомы, физикальное обследование, другие серологические тесты). Диагноз первичной или вторичной мембранной нефропатии не должен устанавливаться на основании результатов одного теста 4. Отсутствие циркулирующих анти-PLA2R-антител не исключает диагноз первичной мембранной нефропатии 2

Библиография
1. Beck LH Jr, Salant DJ. Membranous nephropathy: recent travels and new roads ahead. Kidney Int. 2010 May;77(9):765-70.
2. Laboratory Corporation of America.Directory of Services and Interpretive Guide. Phospholipase A2 Receptor Autoantibodies, IgG. www.labcorp.com. 2017. Ref Type: Internet Communication.
3. KDIGO Clinical Practice Guideline for Glomerulonephritis (GN). Kidney Int. 2012 . Suppl. 2:139-274.
4. Mayo Clinic. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog.Phospholipase A2 Receptor (PLA2R) Immunfluorescent Stain, Renal. www.mayomedicallaboratories.com. 2017 Ref Type: Internet Communication.
5. Stanescu HC, Arcos-Burgos M, Medlar A, Bockenhauer D, Kottgen A, Dragomirescu L, Voinescu C, Patel N, Pearce K, Hubank M, Stephens HA, Laundy V, Padmanbahn S, Zawadzka A, Hofstra JM, Cenen MJ, den Heijer M, Kiemeney LA, Bacq-Daian D, Stengel B, Powis SH, Brenchley P, Feehally J, Rees AJ, Debiec H, Wetzels JF, Ronco P, Mathieson PW, Kleta R. Risk HLA-DQA1 and PLA(2)R1 alleles in idiopathic membranous nephropathy. N Engl J Med. 2011; 364(7): 616-26.
6. Beck LH Jr, Bonegio RG, Lambeau G, Beck DM, Powell DW, Cummins TD, Klein JB, Salant DJ. M-type phospholipase A2 receptor as target antigen in idiopathic membranous nephropathy. N Engl J Med. 2009 Jul 2;361(1):11-21.
7. Ronco P, Debiec H. Pathogenesis of membranous nephropathy: recent advances and future challenges. Nat Rev Nephrol. 2012 Feb 28;8(4):203-13.
8. Ma H, Sandor DG, Beck LH Jr. The role of complement in membranous nephropathy. Semin Nephrol. 2013 Nov;33(6):531-42.
9. Arup Consult. Primary Membranous Nephropathy – Membranous Glomerulonephritis. https://arupconsult.com/content/primary-membranous-nephropathy. Reference Type: Internet Communication.
10. Лаборатория Synevo. Конкретные ссылки на технологии работы использованы 2017. Ref Type: Catalog