Бакпосев глазного отделяемого (Антибиотикограмма по необходимости)

Стоимость теста действительна для одного глаза.

Общая информация

Инфекционные возбудители могут поражать различные анатомические структуры глазного яблока, глазницу и вспомогательные органы защиты глаза (брови, веки и слезные железы). Патогенные микроорганизмы чаще инфицируют конъюнктиву и веки. Конъюнктива находится в тесном контакте с роговицей, и поэтому часто происходит двойное инфицирование (кератоконъюнктивит). Персистенция в носовой полости золотистого стафилококка является фактором, способствующим возникновению бактериального конъюнктивита.

Следует учитывать, что в норме только с конъюнктивы и в небольшом количестве (примерно в 94% случаях) регулярно выделяются коагулазоотрицательные стафилококки, иногда -- дифтероморфные бациллы, различные виды Candida и стрептококков, золотистый стафилококк, нейссерии, некоторые виды Haemophilus, Enterobacteriaceae, Pseudomonadae, антракоидные бациллы, редко можно выделить анаэробные бактерии, спорообразующие или неспорообразующие, сапрофитные или условно-патогенные микобактерии и виды некоторых оппортунистических или сапрофитных грибков: Апсидия, Cryptococcus и др.

Этиология глазных инфекций зависит от пораженной анатомической структуры.

Блефарит: бактерии (например, Staphylococcus aureus), вирусы (например, герпеса), редко -- паразиты (например, Phthirus pubis).

Конъюнктивит: причиной конъюнктивитов в преобладающем количестве случаев являются стафилококки (79,2%). Staphylococcus aureus чаще обнаруживается при остром (43,6%), a Staphylococcus epidermidis -- хроническом конъюнктивите (83,5%).

Другими возбудителями острых гнойных и хронических конъюнктивитов являются Neisseria gonorrhoeae, Moraxella lacunata, Branhamella catarrhalis, коринебактерии, Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans, Streptococcus faecalis, Haemophilus aegypticus, Haemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, микроорганизмы семейств Enterobacteriaceae, родов Proteus, Klebsiella, Escherichia. Реже встречаются Listeria monocytogenes, грибы рода Candida, Aspergillus.

У новорожденных (при прохождении плода по родовым путям): Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis.

У детей и взрослых: Haemophilus influenzae, S. pneumoniae, S. aureus, Moraxella spp., Chlamydia trachomatis (трахома у взрослых), грибки, вирусы (аденовирусы, энтеровирусы, Коксаки-вирус).

Кератит: P.aeruginosa, S. aureus, S. pneumoniae, HSV (Herpes simplex virus).

Системные инфекции могут вызвать и глазные инфекции в иммуноослабленном организме (например, ВИЧ-инфицированные пациенты), из которых отмечаются следующие патогенные возбудители: цитомегаловирус, пневмоцистис каринии, Cryptococcus neoformans, Candida spp.

Помимо вышеперечисленных микроорганизмов, являющихся возможными возбудителями воспалительных процессов не только глаз, но и других систем и органов человека, известны микроорганизмы, обуславливающие только конъюнктивиты. К ним относятся Haemophilus aegyptius, Moraxella lacunata, Branchamella catarrhalis.

При выявлении специфических возбудителей интерпретация результатов не вызывает трудностей. В случаях, когда процесс вызывается условно-патогенными бактериями, необходимо применение количественных критериев оценки. При острых воспалительных процессах обычно высевают в большом количестве монокультуры микроорганизмов. Более трудна интерпретация результатов микробиологического исследования при хронических воспалительных процессах, когда выявляют ассоциации бактерий. В таких случаях важна количественная оценка роста различных видов в ассоциации.

Необходимо иметь в виду, что в процессе лечения антибактериальными средствами нередко происходит замена бактериальной флоры на грибковую. Для постановки диагноза важен анализ качественного и количественного состава микрофлоры и их корреляция с клиническими проявлениями воспалительного процесса. Этиологически значимым является наличие микроорганизмов в титре 104-105 и более КОЕ/мл. Посев на гонорею назначается отдельно. Тест не включает посев на вирусы и хламидии.

Метод диагностики

• бактериальные культуры;
• вирусные культуры;
• иммуноферментные методы (антиген Chlamydia trachomatis);
• метод иммунофлуоресценции • вирус герпеса);
• методы молекулярной биологии для диагностики вирусных и хламидийных кератоконъюнктивитов в референтных лабораториях 1.

В лабораториях Synevo глазная секреция исследуется только с бактериологической точки зрения 3.

Для микробиологического исследования глазных инфекций образцы должны быть собраны в офтальмологическом кабинете или в операционной офтальмологом 2.

Сбор образца должен быть выполнен до:

• туалета для лица, который удалит выделения и конъюнктивальный экссудат;
• антимикробной, местной или системной терапии (снижается вероятность выделения инфекционного агента) или кортикотерапия (модификация цитологии);
• применения раствора флуоресцеина • денатурирует иммунофлуоресцентные красители);
• макияжа (затрудняет цитобактериоскопическое обследование)2.

В обычных случаях в офтальмологическом кабинете сбор проводится, когда пациент сидит на стуле, положив голову на спинку стула. Опускается нижнее веко, чтобы выделить дно конъюнктивального мешка, из которого собирают материал с помощью 2 тонких подушечек. Если веки сильно опухли, они будут собираться – подушечкой или платиновым ансом – непосредственно с уровня внутреннего угла, без опускания века. В случае наличия ячменя, забор пробы производится напрямую4.

Внешний вид глаз и придатков может быть ключом к диагностической ориентации, поэтому отмечаются следующие аспекты:

• наличие или отсутствие конъюнктивального экссудата;
• внешний вид экссудата: серозный, серо-Гнойный, Гнойный, Муко-Гнойный, фибринозный, псевдомембранозный;
• внешний вид слизистой оболочки: отек, застой, кровоизлияние, фолликулярная, папиллярная реакция, язвы и т. д.

Сбор материала делают обязательным с обоих глаз, на отдельных подушечках.

Транспортировка образцов и посев должны производиться немедленно, поскольку подавляющее большинство микробов в поражениях конъюнктивы имеют низкую жизнеспособность во внешней среде. Для определения антигена хламидий сбор материала будет производиться на специальных контейнерах 3;4.

Микроскопическое исследование проводится на мазках, окрашенных по Граму (для выявления микробов) и Гимзе (для оценки воспалительной реакции). При бактериальном конъюнктивите преобладают нейтрофильные полиморфонуклеары, а при вирусных инфекциях-лимфоциты и моноциты.

Бактериальные культуры проводят на колумбийском агаре с 5% крови овцы и шоколадным агаром (с инкубацией в атмосфере 5% CO2, 24 часа при 35-37°c)4. Подозрительные колонии размножаются и идентифицируются в соответствии со стандартными процедурами для каждого семейства микроорганизмов. По просьбе врача проводят посевы в условиях Сабуро с хлорамфениколом для выделения фунгилор3.

Интерпретация бактериальных культур должна соответствовать микроскопическому исследованию. Всегда бактерии, выделенные из культуры, должны находиться на мазке, чтобы иметь возможность поддерживать их участие в патологии. Если микробы находятся внутри протоков, безусловно, изолированный микроорганизм является патогенным. Он перейдет к его идентификации на уровне вида и выполнит антибиотикограмму.  Это будет достигнуто в среде Мюллера-Хинтона, Мюллера-Хинтона с 5% крови барана или в среде HTM (Haemophilus Test Medium) в зависимости от типа изолированного микроба. Диски, пропитанные антибиотиком, также выбираются в зависимости от изолированных микробов.

В бюллетене результатов не сообщается о сапрофитных микробах, таких как Staphylococcus epidermidis и Corynebactecterium spp.

Упоминание: в лаборатории Synevo для экстренных случаев доступна автоматизированная система идентификации бактерий и проведения антибиотикограммы с высвобождением результата в течение 24 часов после выделения микробов в чистой культуре 3.

Библиография

1. Betty A.Forbes, Daniel F.Sahm, Alice S.Weissfeld. Infections of the Eyes, Ears and Sinuses. In Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology. Mosby, USA, 11 ed. 2002, 917-923.

2. Dumitru Buiuc. Diagnosticul de laborator al infectiilor oculare. In Tratat de Microbiologie Clinica. Dumitru Buiuc, Marian Negut, Ed. Medicala, Romania,1 ed. 1999, 319-337.

3. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog

4. Ministerul Sanatatii AdSM. Metode de laborator de uz curent. Editura Medicala, Romania, vol II ed. 1997, 90-92.