Дефицит ДПГ (DPYD IVS14 + 1 G> A) -токсичность 5-ФУ

Дигидропиримидиндегидрогеназа (DPD) - это фермент, который определяет скорость метаболизма пиримидиновых, урациловых и тимидиновых оснований. DPD также катализирует детоксикацию химиотерапевтических агентов на основе пиримидина, 5-фторурацила (5-FU) и капецитабина, ответственных за удаление ~80% введенной дозы(3).

5-Фу является цитостатическим агентом, используемым в течение нескольких десятилетий при лечении опухолей: колоректальных, молочных желез, головы и шеи. Его действие основано на антиметаболитовом эффекте фторпиримидинов, который вызывает дефицит тимидина путем ингибирования тимидилатсинтазы и, наконец, приводит к предотвращению синтеза ДНК(4).

Низкая активность DPD связана с тяжелой, иногда смертельной миелосупрессией при приеме стандартных доз 5-FU. Таким образом, синдром дефицита DPD проявляется тяжелой диареей, мукозитом, нейротоксичностью и, в некоторых случаях, смертью. Это представляет собой настоящий фармакогенетический синдром, поскольку он не может быть клинически идентифицирован до момента воздействия химиотерапевтического агента(5).

Дефицит фермента вызван в ~50% случаев мутацией в гене DPD на хромосоме 1, называемой IVS14+1G > A или DPYD*2A. мутация состоит из обмена оснований G>A на уровне сплайсингового соединения интрона 14, что приводит к „пропуску” экзона 14 из транскрипции и, таким образом, к делеции 165 п. н. Из мРНК DPD Гомозиготный генотип DPYD*2A приводит к полному ферментативному dficit, тогда как гетерозиготный генотип связан с частичным дефицитом

Прямое измерение каталитической активности DPD довольно сложно, потому что единственной тканью, содержащей достаточное количество фермента, является ткань печени, а выполнение биопсии представляет собой инвазивный маневр для пациента. В качестве альтернативы были разработаны тесты, определяющие активность DPD в лимфоцитах периферической крови, но они также показывают трудоемкие рабочие протоколы, и полученные значения не всегда коррелируют с токсичностью 5-FU; также возможно измерить скорость генерации метаболита 5-FU после введения дозы цитостатический тест.

Генотипирование DPD представляет собой потенциальную диагностическую возможность для повышения эффективности и безопасности терапии 5-фу или капецитабином. Тем не менее, учитывая, что на активность DPD могут влиять помимо генетических и возрастных факторов, пола, образа жизни, сопутствующих лекарств, необходимы более масштабные исследования для всеобщего принятия генетического скрининга перед лечением в сочетании с прямым определением ферментативной активности.

До сих пор не было точных рекомендаций относительно терапевтического отношения у пациентов с дефицитом DPD; одним шагом в этом направлении были Volk и его сотрудники, которые сообщили, что пациенты с очень низкой активностью DPD успешно лечились альтернативной терапией(4).

Рекомендации по генотипированию DPD:

• выявление пациентов с риском развития токсичности при приеме 5-фу или капецитабина;
• установление необходимости корректировки дозы или выбора альтернативной терапии (3).

Подготовка пациента- специальная подготовка не требуется; в отправном билете в лабораторию будет указано лекарство, для которого запрашивается тест(1).

Собранный образец- венозная кровь(1).

Контейнер для сбора -vacutainer, содержащий ЭДТА в качестве антикоагулянта(1).

Собранное количество-насколько позволяет вакуум(2).

Причины отторжения образца-использование гепарина в качестве антикоагулянта; коагулированные или гемолизированные образцы(2).

Стабильность образца - 7 дней при 2-8ºC1.

Метод-секвенирования exon14 для идентификации мутации IVS14+1G>A1.

Отчетность и интерпретация результатов

Будет сообщено о наличии или отсутствии мутации IVS14+1G>A; в случае положительного результата будет сообщен гетерозиготный/гомозиготный статус(1).

Тест обнаруживает только мутацию IVS14 + 1G>a гена DPD. Другие мутации не могут быть идентифицированы(1).