Гемосидерин в моче

В гемолитических процессах гиперплазия красного ряда происходит в костном мозге, что приводит к увеличению скорости синтеза эритроцитов в 6-8 раз по сравнению с нормальным. В результате нормальный костный мозг в большинстве случаев способен компенсировать гемолитический статус в условиях, когда продолжительность выживания гема уменьшается с 120 дней до 15-20 дней. Однако, когда продолжительность жизни гема настолько коротка, что механизм медуллярной компенсации превышен, наступает анемия10.

Текущий диагноз гемолиза основан на следующих 4 маркерах: непрямая гипербилирубиемия и повышенные выделения уробилиногена в моче (что сигнализирует о гиперкатаболизме протопорфирина), наряду с ретикулоцитозом и эритроидной гиперплазией костного мозга (как сигналы повышенной выработки эритроцитов)3.

Гемолиз обычно характеризуется следующими модификациями 10:

Ускоренное разрушение эритроцитов

Ускоренный эритропоэз

- уменьшение продолжительности жизни эритроцитов - рост катаболизма гема -увеличение косвенного билирубина -увеличение производства окиси углерода повышенный мочевой уробилиноген - Повышенный ЛДГ - снижение гаптоглобина - признаки внутрисосудистого гемолиза гемоглобинемия гемоглобинурия гемосидеринурия - метемальбуминемия - снижение сывороточного гемопексина - снижение гликированного гемоглобина - снижение гемоглобина на >1.0 г / дл / неделю

- ретикулоцитоз - макроцитоз - появление мазка крови полихроматофилия базофильные точки эритробласты пойхилоцитоз - исследование КМ (эритроидная гиперплазия) - увеличение оборота плазменного железа - повышение уровня креатина эритроцитов

 

Гемосидерин в моче

Обычно гемосидерин содержится в печени, селезенке, костном мозге, но не в моче.

После гемолиза, когда гемоглобинемия находится в пределах 50-200 мг / дл, а способность гаптоглобина связывать гемоглобин превышена, гемоглобин попадает в клубочковый фильтрат, откуда он частично реабсорбируется, а железо в гемоглобине включается на уровне клеток проксимальных канальцев в ферритин и гемосидерин. Впоследствии эти трубчатые клетки отслаиваются в моче. Поэтому гемосидеринурия отражает тот факт, что гемоглобинемия была недавней. Экскреция железа с мочой может быть обнаружена через несколько дней после острого эпизода внутрисосудистого гемолиза и может сохраняться в течение определенного периода времени после его прекращения (несколько недель). В большинстве ситуаций, связанных с хроническим внутрисосудистым гемолизом экскреция железа с мочой является постоянным проявлением, в то время как гемоглобинурия возникает периодически.

Если гемоглобин не может всасываться в клетках почечных канальцев, возникает гемоглобинурия 3; 8; 10.

Рекомендации по проведению гемосидерина в моче

• диагностика состояний, связанных с массивным гемолизом эритроцитов, является наиболее ценным показателем хронического внутрисосудистого гемолиза;
• скрининг-тест на пароксизмальную ночную гемоглобинурию (HPN)8.

HPN-это редкое приобретенное заболевание гемопоэтических стволовых клеток, характеризующееся следующей клинической триадой:

• внутрикорпускулярная гемолитическая анемия из-за аномальной восприимчивости мембраны эритроцитов к гемолитической активности комплемента;
• тромбозы, в основном венозные, в крупных сосудах: печеночных, брыжеечных, селезеночных, мозговых, почечных или кожных венах;
• панцитопения, обусловленная дефицитом кроветворения различной степени тяжести.

Оба пола страдают одинаково. Хотя это доброкачественное клональное заболевание, оно имеет длительное клиническое течение, которое может быть связано с апластической анемией и, в конечном итоге, с острым лейкозом. Патогенный элемент представлен биохимическим дефектом, присутствующим на уровне всех гемопоэтических клеток – частичным или полным дефицитом важной группы мембранных белков, называемых регуляторными поверхностными белками комплемента, которые включают: DAF (decay-accelerating factor или CD55), HRF (гомологичный ограничительный фактор или C8 binding factor) и MIRL (мембраны ингибитор реактивного лизиса или CD59). Эти белки обычно взаимодействуют с белками комплемента, особенно с C3b и C4b, диссоциируют комплексы конвертаз классического и альтернативного путей и останавливают усиление процесса активации. Гемолитическая анемия в HPN возникает из-за опосредованной комплементом внутрисосудистой деструкции эритроцитов в результате неконтролируемой амплификации системы комплемента в отсутствие регуляторных белков. Биохимический дефект основан на генетической мутации, которая приводит к неспособности синтеза якоря гликозилфосфатидилинозита, который связывает регуляторные белки комплемента с клеточной мембраной. Соответствующий ген-PIGA (phosphatidylinositol glycan class A) - на уровне Х-хромосомы может претерпевать различные соматические мутации, от делеций до точечных мутаций.

Гемосидерин, как показатель внутрисосудистого гемолиза, в большинстве случаев присутствует в осадке мочи, поэтому он является полезным элементом при первоначальной оценке пациентов с подозрением на HPN5.

Принцип реакции

Окрашивание основано на Реакция Перлса( Срез при этом окрашивают жёлтой кровяной солью, с которой двухвалентное железо образует берлинскую лазурь синего цвета) , в которой ионное железо, не связанное с гемоглобином (Fe3+), реагирует с ферроцианидом калия в кислой среде (раствор HCl). Ионы железа осаждаются в виде нерастворимого ферроцианида железа, интенсивно окрашенного соединения сине-бирюзового цвета, таким образом локализуя отложения железа в мочевых отложениях7.

Собранный образец-спонтанный образец мочи (первая утренняя моча), без консервантов 1.

Причины отторжения образца:

- образец мочи, содержит консерванты;

- образцы, которые не соответствуют условиям стабильности 7.

Контейнер для сбора образца-контейнер для сбора мочи 7.

Собранное количество-10 мл7.

Необходимая обработка после сбора образца-образец перемешивают с целью получения осадка мочи (при 2000 об / мин в течение 5 мин)7.

Стабильность образца:

- окружающая среда: 1 час; охлажденный 24 часа; замороженный 1 неделя1.

Метод - (метод Роуса) микроскопическое исследование.

Микроскопическое исследование:

Несколько капель не окрашенного мочевыделительного осадка исследуются на предмет выделения желто – коричневых зерен гемосидерина. Если они присутствуют, оставшийся осадок ресуспендируется в окрашивающем растворе, оставляют на 10 минут, затем перемешивают и исследуют вновь полученный осадок. Если гранулы не выделяются через 10 минут, образец повторно исследуется через 30 минут (иногда реакция может задерживаться)5.

Отложения железа могут быть в виде аморфной массы или неравных гранул, обычно больших, расположенных внутриклеточно (в макрофагах, трубчатых клетках) и/или внеклеточно, иногда в форме цилиндров.

Внутриклеточный гемосидерин более значим, чем внеклеточный, который иногда может составлять артефакт2;4.

Референтные значения

Гемосидерин с мочой-отсутствие2; 9.

Интерпретация результатов

Положительная реакция на гемосидерин указывает на чрезмерное разрушение гематисов с выделением циркулирующего гемоглобина и истощением гемопексина и гаптоглобина (ожоги, болезнь холодовых агглютининов, посттрансфузионные гемолитические реакции, механическое разрушение эритроцитов, мегалобластная анемия, гемолитическая микроангиопатическая анемия, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, серповидно-клеточная анемия, большая талассемия, гемолизм, связанный с окислительными препаратами или без дефицита G6PD, клостридная экзотоксемия).

Присутствие гемосидерина обычно отражает внутрисосудистый гемолиз, но также может быть связано с геморрагическим панкреатитом.

Гемосидеринурия сохраняется после исчезновения гемоглобинурии и позитивности ткани для эритроцитов на полосе мочеиспускания8; 9.

Гемосидеринурия также встречается у пациентов с гемосидерозом или гемохроматозом 10.

Границы и помехи

Гемосидерин не может быть обнаружен в щелочной моче2; 9.

Гемосидерин может быть отрицательным в первые дни после гемолитического пузея10.

Библиография