Лимфоцитарное иммунофенотипирование - основной профиль

Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлюориметрии.

Иммунофенотипирование – это характеристика клеток, полученная при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития.

CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентномеченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии рассчитать содержание лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлюориметрии лежит фотометрическое и флюоресцентное измерение отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов –

• Т-лимфоциты (CD3⁺CD19^-),
• Т-хелперы/индукторы (CD3⁺CD4⁺CD45⁺),
• Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3⁺CD8⁺CD45⁺),
• истинные натуральные "киллеры" (NK-клетки) (CD3^-CD56⁺CD45⁺),
• В-лимфоциты (CD19⁺CD3^-), –

но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

• Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3⁺CD16⁺56⁺CD45⁺),
• NK-клетки цитолитические (CD3^-CD16^+(orhigh) CD56^dimCD45⁺),
• NK-клетки цитокинпродуцирующие (CD3^-CD16^-(orlow) CD56^brightCD45⁺),
• NK-клетки, экспрессирующие альфа-цепь антигена CD8 (CD3^-СГ8⁺CD45⁺),
• активированные В-лимфоциты (CD3^-CD25⁺CD45⁺),
• активированные Т-лимфоциты (CD3⁺HLA-DR⁺CD45⁺) и активированные цитотоксические лимфоциты (CD8⁺HLA-DR⁺CD45⁺),
• В-лимфоциты и активированные NK-клетки (CD3^-HLA-DR⁺CD45⁺),
• активированные Т-лимфоциты, экспрессирующие альфа-цепь рецептора ИЛ-2 (CD3⁺CD25⁺CD45⁺),
• регуляторные Т-хелперные клетки (CD4⁺CD25^brightCD127^negCD45⁺), выполняющие иммуносупрессорную функцию.

Такое всестороннее изучение клеточного состава лимфоцитов в совокупности с результатами других тестов, входящих в состав исследования, позволяет установить более тонкие механизмы иммунологических нарушений. Они про­водятся для уточнения степени и глубины поражения иммунной системы и подбора препарата для проведения последующей адек­ватной иммунокорригирующей терапии, оценки эффективности проводимого лечения, определения прогноза течения заболевания.

Когда назначается исследование?

Исследование рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска с инфекционным иммунопатологическим синдромом:

• частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов: гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, вирусные пневмонии с тенденцией к рецидивированию;
• урогенитальные инфекции;
• рецидивирующий герпес различной локализации;
• гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
• длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
• генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты и т.д.

Как подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона  алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
• Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.