Микроделеции короткого плеча Y-хромосомы (SRY)

Общая информация

Нормальный набор хромосом в соматической клетке человеческого вида содержит 46 хромосом, сгруппированных в 22 пары аутосом (1-22) и пару, содержащую половые хромосомы (XX у женщин и XY у мужчин).

Мужская половая принадлежность определяется Y-хромосомой, поэтому в ее присутствии независимо от числа Х-хромосом образуются яички. Доминирующий эффект Y-хромосомы определяется наличием генов на ее коротком плече, в области, называемой TDF (фактор, определяющий семенник) 1; 2. В 1990 году ген SRY (факторы, определяющие пол на Y-хромосоме) был идентифицирован в области TDF, расположенной рядом с псевдоаутосомной областью на коротком плече Y-хромосомы, Yp11.23.
Определение пола у человека контролируется наличием гена SRY, экспрессия которого запускается через 7 недель беременности2.

Ген SRY в Y-хромосоме содержит один экзон и кодирует белок фактора транскрипции (содержащий 204 аминокислоты), член семейства белков HMG (группа высокой подвижности) 3; 4. Он представляет собой «проводник» дифференцировки гонад, воздействуя на недифференцированные эмбриональные гонады, которые он трансформирует в яички, определяя тем самым развитие эмбриона по отношению к мужскому полу. SRY трансформирует мозговое вещество прогонады в яичко, контролирует секрецию тестостерона из клеток Лейдига, регулирует экспрессию AMH (антимюллерианового гормона), гена DSS (дозо-зависимого изменения пола), участвующего в развитии яичников, и гена SOX9 ( SRY - Box9), который направляет процесс организации семенников, из которых будут образовываться семенные канальцы2; 3; 5.

Патологические состояния, включающие изменения в гене SRY5; 6:

1. Синдром Swyer (полный дисгенез гонад) - вызван мутациями в гене SRY. Мутации в гене SRY были выявлены у 15-20% пациентов с синдромом Swyer. Эти мутации предотвращают образование функционального белка SRY, так что пациент будет фенотипически развиваться как женщина, хотя формула хромосомы 46, XY7.
2. Нарушение полового развития с образованием яичка у пациентов с хромосомной формулой 46, XX. Чаще всего это состояние возникает из-за ненормального обмена генетическим материалом между X и Y хромосомами (транслокация). Это явление происходит во время отцовского мейоза. Ген SRY больше не будет располагаться на коротком плече Y-хромосомы, а на одной из X-хромосом. Плод, у которого есть X-хромосома с транслоцированным на нем геном SRY, будет фенотипически развиваться как человек, даже если у него нет Y-хромосомы7.
3. Другие состояния, вызванные аномалиями в гене SRY Мутации в гене SRY, которые влияют, но не отменяют функцию области TDF, были выявлены у пациентов с нарушениями полового развития, такими как частичный дисгенез половых желез. У этих пациентов может быть неоднозначность наружных половых органов или другие аномалии репродуктивной системы8.

Рекомендации по идентификации микроделеций на коротком плече Y-хромосомы

• бесплодие;
• пациенты с синдромом Тернера;
• пациенты с неоднозначностью половых органов7; 8; 9.

Собранный образец - венозная кровь; перед взятием пробы крови пациент подпишет форму информированного согласия10.
Контейнер - вакутейнер, содержащий гепарин натрия в качестве антикоагулянта10.
Количество собранных - 5 мл крови10.
Причины отторжения - уборка по другому типу антикоагулянта; образцы старше 72 часов; тест на коагуляцию10.
Метод работы - классическая методика G-banding и FISH-тестирование гена SRY с использованием зондов Cytocelll9 9; 10.

Тест FISH для определения региона SRY

Зонд для области SRY состоит из 2 непересекающихся последовательностей 30 и 50 кБа соответственно. Эти последовательности охватывают весь ген SRY и области ДНК, которые окружают его. Набор содержит контрольные образцы для центромеры, Y-хромосомы и гетерохроматической области на длинном плече хромосомы.
Тест включает хромосомный анализ крови (кариотип) и тест FISH на ген SRY.

Интерпретация результатов

У нормальных мужчин XY - в анализируемых клетках будут наблюдаться: 1 красный сигнал (SRY), 1 зеленый сигнал (область гетерохроматина на длинном плече Y-хромосомы) и 1 синий сигнал (центральная область X-хромосомы, контроль). Если происходит удаление гена SRY, в анализируемых клетках будет наблюдаться 1 зеленый сигнал и 1 синий сигнал.

У пациентов с мужским фенотипом, но с хромосомной формулой 46, XX, будут наблюдаться 2 синих сигнала и 1 красный сигнал.

Список используемой литературы

Parker K.L. et al. Генные взаимодействия в развитии гонад, Annu. Rev. Physiol. 1999, 61: 417-433.
Merchant-Larios H, Moreno-Mendoza N. Начало половой дифференциации: диалог между генами и клетками, Arch Med Res. 2001; 32: 553-8.
Бо С, Вивиан Н., Мунстерберг А., Дрессер Д., Ловелл-Бэдж Р., Герье Д., Анализ in vivo регуляции анти-мюллерового гормона, как маркера дифференцировки клеток Сертоли во время развития яичка, показывает многоступенчатый процесс, Мол Репрод Дев. 2001; 59: 256-64.
Хайкова П., Эрхардт С., Лейн Н., Хааф Т., Эль-Маарри О., Рейк В., Уолтер Дж., Сурани М. Эпигенетическое перепрограммирование в первичных половых клетках мыши. Мех дев. 2002; 117:15.
Скаккебек Н.Е., Райперт-Де Мейтс Э., Йоргенсен Н., Карлсен Э., Петерсен П.М., Гиверман А., Андерсен А.Г., Йенсен Т.К., Андерссон А.М., Мюллер Дж. Рак половых клеток и расстройства половых органов наружных сперматогенов: экологическая связь? APMIS. 1998; 106: 3-11.
Queipo G, Zenteno JC, Pena R, Nieto K, Radillo A, Dorantes LM, Erana L, Либерман E, Содерлунд D, Хименес А.Л., Рамон G, Кофман-Альфаро С. Молекулярный анализ в истинном гермафродитизме: демонстрация скрытого низкого уровня мозаицизм для Y-производных последовательностей в 46, XX случаях. Hum Genet. 2002; 111: 278-83.
Связь www.ghr.nlm.nih.gov/condition/swyer-syndrome Тип ссылки: Интернет.
Связь www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1682856 Тип ссылки: Интернет.
Связь www.cytocell.com Тип ссылки: Интернет.
Synevo лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2014 году. Тип ссылки: Каталог