Неинвазивное пренатальное обследование анеуплоидий у плода (NIFTY)

Этот тест требует предварительной записи по телефону 079856990.

Синоним: свободная эмбриональная ДНК в материнской крови

NIFTY - Общая информация

Неинвазивное пренатальное тестирование NIFTY использует свободную ДНК плода из плазмы беременных женщин для скрининга анеуплоидий плода с участием хромосом 13, 18, 21, X и Y. NIFTY также дает возможность тестирования трисомий 9, 16 и 22, синдрома Ван дер Вуда, синдромов делеции Прадера-Вилли/Ангельмана, Якобсена и Ди Джорджи (22q11.2).

Свободно циркулирующая ДНК плода, которая составляет около 3-13% от общей свободной материнской ДНК, происходит в основном плаценты и исчезает в течение нескольких часов после рождения плода

Присутствие ДНК плода в материнской плазме было впервые продемонстрировано в 1997 году, используя в качестве модели последовательности ДНК Y-хромосомы, полученные от плода мужского пола 2, позже были подтверждены и другими исследователями. Это открытие показало, что материнская ДНК в плазме представляет собой химерную смесь материнской и эмбриональной ДНК. До демонстрации этого химеризма ДНК образцы материнской плазмы не представляли источника для молекулярного анализа, причем исследователи интересовались только зародышевыми клетками плода в материнском кровообращении.

Первоначальные попытки обнаружить анеупоидии плода с использованием свободно циркулирующей ДНК плода требовали использования кратных маркеров ДНК или РНК плаценты, что делало скрининг дорогостоящим и трудоемким. Недавно несколько групп исследователей подтвердили технологию массового параллельного геномного секвенирования, которая может количественно оценить миллионы фрагментов ДНК в биологических образцах и с высокой точностью обнаружить трисомии 13, 18 и 21. Используя архивные образцы крови пациентов с высоким риском анеуплоидий плода, которые проводили инвазивную пренатальную диагностику, несколько широко проведенных валидационных исследований показали, что частота обнаружения трисомий 13, 18 и 21 составляет > 98%, с низким процентом ложноположительных результатов. Хотя проспективных исследований, основанных на этой технологии, нет, похоже, что анализ свободно циркулирующей ДНК плода является наиболее эффективным инструментом скрининга анеуплоидий плода у женщин с повышенным риском.

Тест NIFTY™ (неинвазивный тест на трисомию плода) был разработан BGI, первой компанией, которая поставила неинвазивную пренатальную диагностику и накопила важный опыт, основанный на наибольшем количестве проведенных тестов. Таким образом, согласно статистике за апрель 2014 года, BGI Diagnostics провела 292 248 тестов с точностью >99%.

Тест исследует периферическую материнскую кровь и использует современную технологию секвенирования (секвенирование следующего поколения NGS) для выявления после 10 – й** недели беременности 3 основных хромосомных анеопоидий плода: трисомия 21, 18 и 13.

Факультативно, тест также предлагает другие варианты тестирования, которые включают: трисомии 9, 16, 22, генетическую идентификацию пола, анеуплоиды половых хромосом, синдромы делеций:

	Процент обнаружения (одноплодная беременность)	Действительно для многоплодной беремености
Трисомии –          Трисомия 21 (Синдром Дауна) –          Трисомия 18 (Синдром Эдвардса) –          Трисомия 13 (Синдром Патау)	99.12%*	Да
+ Опции для дополнительного тестирования
Генетическое определение пола	98%**	Нет
Трисомии –          Трисомия 9 –          Трисомия 16 –          Трисомия 22	Не проверенный процент обнаружения	Нет
Анеуплоиды половых хромосом –          Моносомия X (Синдром Тернера) –          XXY ( Синдром Клайнфельтера) –          XXX –          XYY	95%**	Нет
Синдромы делеции –          5p (Синдром Лежена (Cri-Du-Chat Syndrome) –          1p36 –          2q33.1 –          Синдром Прадера Вилли/Ангельмана (15q11.2) –          Синдром Якобсена (11q23) –          Синдром Ди Джорджи II (10p14-p13) –          16p12 –          Синдром Ван дер Вуда (1q32.2)	Не проверенный процент обнаружения	Нет

Исследование, не являющееся инвазивным, позволяет избежать риска аборта и внутриутробной инфекции, связанной с инвазивным пренатальным тестированием (путем амниоцентеза или отбора проб ворсинок хориуса), а обнаружение анеуплоидий плода позволяет проводить раннее вмешательство

Клиническая валидация теста NIFTY проходила в два этапа. На первом этапе было проведено двойное слепое исследование, в котором было проанализировано 3464 образца с целью установления прогностической ценности теста NIFTY для трисомий 21, 18 и 13 в группе высокого риска, а также оценки его чувствительности и специфичности по сравнению с результатом кариотипа в околоплодных водах (считается „золотым стандартом”). Чувствительность и специфичность 100% и 99.97% были продемонстрированы соответственно для трисомий 21, 18 и 13. На втором этапе тест NIFTY был широко подтвержден в многоцентровом исследовании, в котором рассматривалось 11 105 случаев. Положительные результаты были получены в 190 случаях, включая 143 случая с трисомией 21 и 47 случаев с трисомией 18. Ложноотрицательных результатов обнаружено не было; сообщалось о 2 ложноположительных результатах для трисомии 21 и трисомии 18 соответственно. Таким образом, тест продемонстрировал 100% чувствительность и 99, 96% специфичность для выявления трисомий 18 и 21, и исследователи пришли к выводу, что введение этого скринингового теста в текущую медицинскую практику может избежать примерно 98% инвазивных пренатальных диагностических процедур.

Рекомендации по проведению теста NIFTY

• возраст беременной более (>35 ani);
• ультразвуковые признаки, указывающие на хромосомные аномалии плода;
• выявление повышенного риска хромосомных аномалий при рождении после скрининга первого триместра, второго триместра или интегрированного скрининга;
• наличие у одного из родителей сбалансированной робертсоновской транслокации, предрасполагающей к аневпоидиям плода;
• пациентки, имеющие противопоказания к инвазивным методам пренатальной диагностики: предлежание плаценты, неизбежность аборта или инфекции HBV / ВИЧ;
• пациентки, подвергшиеся оплодотворению in vitro или ранее перенесшие потерю беременности(выкидыш);
• тест представляет собой вариант для любой беременной женщины, срок беременности которой составляет от 10** до 24 недель беременности, и которая хочет провести неэвазивный тест для выявления анеупоидий плода

Подготовка пациента:

Рекомендуется соответствующее предварительное тестирование

Пациентка должна пройти УЗИ, подтверждающее гестационный возраст.

Тест можно проводить между 10-й * * неделей и 24-й неделей беременности. Рекомендуется, чтобы врач предоставил подробную ультразвуковую информацию, которая оценивает недели беременности, особенно для ранней беременности. Также рекомендуется генетическая консультация до и после проведения теста NIFTY, если беременность > 18 недель

Перед забором образца пациенты в обязательном порядке заполняют 3 формы: de cerere, de consimțământ și de asigurare (включая информацию о полезности пренатального неинвазивного тестирования, а также его пределы).

Для сбора образца не требуется специальной подготовки. Однако из-за особенностей системы сбора это будет выполняться только в филиалах Synevo.

Лаборатория Synevo предлагает генетическую консультацию в Centrul de recoltare Grozovici (Dr. Grozovici, nr. 6, sector 2, București), с предварительной записью по номеру 021 9666.

Дни забора материала: понедельник - среда: 7.00-14.00 si joi: 7.00 - 10.00 для филиалов Бухареста и понедельник – среда для филиалов страны, на основании предварительной записи в филиале каждой лаборатории.

Собираемый образец - венозная кровь⁸.

Контейнер для сбора - вакууконтейнер Streck-Cell-Free BCT⁸.

Обязательная обработка после сбора - для обеспечения оптимальной гомогенизации крови выполните 10 легких движений трубки

Обьем собранного материала - мин. 10 mL⁸.

Стабильность образца - для обеспечения стабильности образца до прибытия в лабораторию, где проводится тестирование, образец будет храниться при температуре 6-24°C в оригинальной коробке.

Если образец собирается в центрах по всей стране, он должен прибыть в течении 24 часов в центральную лабораторию.

Метод - современное секвенирование (NGS) и биоинформатический анализ

Интерпретация результатов

Границы и помехи

Скачайте форму согласия ЗДЕСЬ.

*Страница 3 заполняется лабораторией Synevo

**10 полных недель

Библиография

1. The American College of Obstetricians and Gynecologists. The Society for Maternal-Fetal Medicin. Commitee Opinion: Noninvasive Prenatal Screening for Fetal Aneuploidy. Number 545, December 2012. www.acog.org.
2. Lo YMD, Corbetta N, Chamberlain PF, Rai V, Sargent IL, Redman CWG, Wainscoat JS. Presence of fetal DNA in maternal plasma and serum. Lancet 1997; 350:485-487
3. SmidM, Lagona F, de Benassuti L, Ferrari A, Ferrari M, Cremonesi L. Evaluation of different approaches for fetal DNA analysis from maternal plasma and nucleated blood cells. Clin Chem1999;45:1570-1572.
4. Houfflin-DebargeV, O’Donnell H, Overton T, Bennett PR, Fisk NM. High sensitivity of fetal DNA in plasma compared to serum and nucleated cells using unnested PCR in maternal blood. Fetal Diagn Ther 2000;15:102-107.
5. Lo YMD. Fetal DNA in Maternal Plasma: Biology and Diagnostic Applications. Clin Chem. 2000 Dec;46(12):1903-6.
6. NIFTY™. Non-Invasive Fetal Trisomy Test. www.niftytest.com.
7. Dan S, Wang W, Ren J, Li Y, Hu H, Xu Z, Lau TK, Xie J, Zhao W, Huang H, Xie J, Sun L, Zhang X, Wang W, Liao S, Qiang R, Cao J, Zhang Q, Zhou Y, Zhu H, Zhong M, Guo Y, Lin L, Gao Z, Yao H, Zhang H, Zhao L, Jiang F, Chen F, Jiang H, Li S, Li Y, Wang J, Wang J, Duan T, Su Y, Zhang X. Clinical application of massively parallel sequencing-based prenatal noninvasive fetal trisomy test for trisomies 21 and 18 in 11,105 pregnancies with mixed risk factors. Prenat Diagn.2012 Dec; 32(13):1225-32.
8. Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.
9. Jiang F, Ren J, Chen F, Zhou Y, Xie J, Dan S, Su Y, Xie J, Yin B, Su W, Zhang H, Wang W, Chai X, Lin L, Guo H, Li Q, Li P, Yuan Y, Pan X, Li Y, Liu L, Chen H, Xuan Z, Chen S, Zhang C, Zhang H, Tian Z, Zhang Z, Jiang H, Zhao L, Zheng W, Li S, Li Y, Wang J, Wang J, Zhang X. Noninvasive Fetal Trisomy (NIFTY) test: an advanced noninvasive prenatal diagnosis methodology for fetal autosomal and sex chromosomal aneuploidies. BMC Med Genomics. 2012 Dec 1;5:57.