ДНК полиомавируса JC

Полиомавирусы человека – вирус JC (JCV) и вирус BK (BKV) - вездесущи и не вызывают заболеваний у иммунокомпетентных людей. 86 и 90% распространенность специфических антител по сравнению с JCV и BKV, соответственно, описана в популяции взрослого возраста.

JCV - это небольшой ДНК-вирус без оболочки, который является этиологическим агентом прогрессирующего мультифокального лейкоэнцефалита (ПМЛ), демиелинизирующего заболевания центральной нервной системы, которое встречается у пациентов с тяжелой иммуносупрессией.

Первичная инфекция возникает в раннем детстве и протекает бессимптомно, после чего JCV сохраняется в организме в латентном состоянии. JCV-ДНК выявляется методом ПЦР в ткани миндалины у 39% здоровых людей, что свидетельствует о возможной оральной или респираторной передаче инфекции. Обнаружение вируса в моче здоровых людей свидетельствует о том, что в почках находится сайт скрытого вируса. Обнаружение JCV-ДНК в костном мозге и мозге людей без ПМЛ также предполагает наличие двух других сайтов вирусной латентности1. Через несколько лет вирус может быть реактивирован у людей с ослабленным иммунитетом, особенно у больных СПИДом; ПМЛ возникает в результате реактивации JCV и характеризуется типичными гистологическими и нейрорадиологическими изменениями.

У пациентов с ПМЛ JCV инфицирует олигодендроциты и астроциты в головном мозге и, реже, в спинном мозге и вызывает их лизис, что приводит к разрушению миелиновой оболочки.

ПМЛ была первоначально описана как осложнение у пациентов с иммунодефицитом с первичными лимфомами ЦНС, лейкемией, иммуносупрессивной терапией при ревматоидном артрите, саркоидозе или после трансплантации органов. В настоящее время иммуносупрессия, вызванная ВИЧ-инфекцией, является наиболее распространенной причиной ПМЛ, частота которой в 50 раз выше по сравнению с другими заболеваниями, вызывающими иммуносупрессию2. Так, у 80% пациентов с ПМЛ есть СПИД, у 13% - злокачественные гематологические заболевания, у 5% - трансплантация костного мозга или твердых органов, у 2% - хронические воспалительные заболевания. Недавно сообщалось о новой группе пациентов с ПМЛ; они получали иммуномодулирующее лечение при различных злокачественных новообразованиях или аутоиммунных заболеваниях, таких как натализумаб при рассеянном склерозе или болезни Крона, ритуксимаб при лимфоме или СКВ и эфализумаб при псориазе.
Распространенность ПМЛ составляет 0,7-8% от показательных для СПИДа заболеваний и остается неизменной после широкого внедрения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) по сравнению с другими оппортунистическими инфекциями и энцефалопатией ВИЧ, частота которых сократилась вдвое после введения HAART.

Повреждения PML являются демиелинизирующими, обычно в нескольких очагах, расположенных в белом веществе. Клиническая картина соответствует топографии пораженных участков, преобладающим двигательным дефицитом, таким как гемипарез.

Предполагаемый диагноз устанавливается на основе исследования с помощью ядерного магнитного резонанса и может быть подтвержден обнаружением вируса JC в спинномозговой жидкости с использованием методов ПЦР. Определенный диагноз является гистологическим: аспект многоочаговой демиелинизации, олигодендроциты с крупными ядрами и крупными причудливыми астроцитами с лопастными ядрами, гиперхроматический2. Тем не менее, биопсия головного мозга может быть недоступна в определенных местах поражений и из-за плохого состояния пациентов. Кроме того, эта инвазивная процедура связана с повышенным риском заболеваемости и смертности. Обнаружение JCV-ДНК в CSF является быстрой неинвазивной альтернативой биопсии мозга. Целевая последовательность специфична для JCV; перекрестные реакции с BKV невозможны.

До широкого применения ВААРТ тест имел чувствительность 72-92% и специфичность 92-100%. После введения ВААРТ аналитическая чувствительность значительно снизилась до 58% без изменения специфичности.

Рекомендации по определению JCV - ДНК - подозрение на PML3.

Подготовка пациента - не требуется.
Собранный образец - спинномозговая жидкость, собранная при люмбальной пункции.
Контейнер для сбора - стерильный контейнер.
Собранное количество - минимум 2 мл.
Обработка - образцы не будут центрифугированы.
Стабильность образца - образцы CSF стабильны в течение 48 часов при 2-4 ° C до экстракции нуклеиновой кислоты

Метод - ПЦР Light-Cycler в режиме реального времени: реакция цепной полимеризации с детекцией накопленного продукта ПЦР в режиме реального времени путем измерения испускаемой флуоресценции (качественный тест)

Контрольные значения - JCV - необнаружимая ДНК.
Предел обнаружения - 10 копий / образец.

Интерпретация результатов

Обнаружение JCV-ДНК в CSF подтверждает клинический диагноз ПМЛ, вызванного этим вирусом.

Отрицательный результат не исключает диагноз ПМЛ