Testarea prenatală neinvazivă pentru aneuploidii fetale – trisomii 13, 18, 21, X, Y, microdeleții (Veracity)

Informații generale și recomandări

Testul VERACITY este un test prenatal non-invaziv de nouă generație dezvoltat în laborator pentru detectarea aneuploidiilor cromozomiale fetale și a microdelețiilor aplicabil pentru sarcinile unice. Folosește o tehnologie brevetată bazată pe cercetarea și dezvoltarea de ultimă generație din domeniul geneticii și a diagnosticării moleculare. A fost dezvoltat de o echipă științifică cu o experiență de peste 25 de ani în domeniul diagnosticului prenatal, medicinei moleculare, genomicii, transcriptomicii, metilomicii și bioinformaticii.

ADN-ul fetal liber circulant ce reprezintă aproximativ 3-13% din ADN-ul matern liber total, derivă probabil în mare parte din placentă și dispare în decurs de câteva ore după nașterea fătului¹. Testul VERACITY măsoară cu acuratețe ADN-ul extracelular liber fetal din sângele matern pentru a detecta prezența aneuploidiilor fetale.

Prezența ADN-ului fetal în plasma maternă a fost demonstrată pentru prima dată de către Lo et al. în 1997, utilizând ca model secvențele ADN ale cromozomului Y provenite de la un făt de sex masculin², fiind ulterior confirmată și de către alți cercetători^3;4. Această descoperire a arătat că ADN-ul matern din plasmă reprezintă un amestec himeric de ADN matern și fetal. Înainte de demonstrarea acestui himerism al ADN-ului, probele de plasmă maternă nu reprezentau o sursă pentru analiza moleculară, investigatorii fiind interesați doar de celulele fetale nucleate din circulația maternă⁵.

Testul VERACITY examinează sângele periferic matern pentru detectarea, după săptămâna a 10-a de sarcină, a celor 3 aneupoidii cromozomiale fetale majore: trisomie 21, 18 și 13⁶ și este disponibil pentru sarcini monofetale, inclusiv pentru cele concepute prin fertilizare in vitro (FIV)⁶.

Facultativ, testul oferă și alte opțiuni de testare, care includ: aneuploidiile X, Y, a microdelețiile (DiGeorge, deleția 1p36, Smith-Magenis, Wolf Hirschhorn) și sexul fetal⁶.

Investigația fiind neivazivă este evitat riscul de avort și infecție intrauterină asociat cu testarea prenatală invazivă (prin amniocenteză sau prelevarea de vilozități coriale) iar detectarea aneuploidiilor fetale permite intervenția precoce⁶.

Recomandări de testare

• Vârsta maternă mai mare de 35 de ani
• Evidențierea unui risc crescut de anomalii cromozomiale în urma screening-ului efectuat prin dublu sau triplu test
• Ecografia fetală anormală
• Nașterea anterioară a unui copil cu anomalii cromozomiale
• Fertilizare in vitro
• Paciente cu contraindicație pentru metodele invazive de diagnostic prenatal
• Istoric familial pozitiv pentru anomalii cromozomiale^1;6

Pregătire pacientă:

Se recomandă ca medicul trimițător să efectueze o consiliere corespunzătoare pretestare.

Pacienta trebuie să prezinte o ecografie care să facă dovada vârstei gestaționale.

Testul poate fi efectuat între săptămâna a 10-a** și săptămâna a 24-a de sarcină. Se recomandă ca medicul trimițător să furnizeze informații ecografice detaliate care estimează săptămânile de sarcină, în special pentru sarcina incipientă. ^6;8

Înaintea recoltării probei pacientele vor completa obligatoriu 1 formular ce conține: formular informații probă, acordul pacientului informat, nota de informare privind prelucrarea de date cu caracter personal (ce includ informații despre utilitatea testării neinvazive prenatale, precum și limitele acesteia).

În vederea recoltării probei nu este necesară o pregătire specială. Datorită particularităților sistemului de recoltare aceasta se va efectua însă numai la sediile Synevo.

Specimen recoltat – sânge venos⁷

Recipient de recoltare – vacutainer Streck-Cell-Free BCT⁷

Volum probă – câte 10 mL în fiecare dintre cele două eprubete prezente în kitul de recoltare⁷

Prelucrare necesară după recoltare – pentru a asigura optima omogenizare a sângelui efectuați 10 mișcări ușoare de inversiune a tubului⁷.

Stabilitate probă – în vederea asigurării stabilității probei până la sosirea în laboratorul unde se efectuează testarea, proba va fi menținută la temperaturi de 6 – 24°C, în cutia originală⁷. Stabilitatea probei este de max. 4 zile.

Dacă proba se recoltează la centrele din țară aceasta trebuie să ajungă în 24h la Laboratorul Central.

Interpretarea rezultatelor

Prin acest test se evaluează trisomiile 13, 18, 21, dar este, de asemenea, posibil să se raporteze și alte aneuploidii cromozomiale sau sindroame de microdeleție (22q11.2, 1p36, 17p11.2, 4p16.3). Rata de detecție a acestor anomalii este apropiată, dar nu egală cu 100%.

Un rezultat „risc înalt” (pozitiv) pentru o anumită condiție genetică dintre cele analizate indică faptul că există o mare probabilitate (>99.9%) ca fătul să fie afectat de boala genetică respectivă. Deoarece VERACITY nu este un test diagnostic, un rezultat pozitiv trebuie confirmat printr-un test de diagnostic prenatal din lichid amniotic sau vilozități coriale.

Deși rata de detecție este foarte mare un rezultat „risc scăzut” (negativ) nu poate exclude în totalitate posibilitatea unei afecțiuni genetice fetale.

În ceea ce privește detecția aneuploidiilor cromozomilor sexuali acuratețea testului este de >99.9%^6;7.

Limite și interferențe

În cazul în care gravidei i s-au efectuat transfuzii cu sânge, transplant sau terapie cu celule stem, există posibilitatea obținerii unui rezultat fals din cauza ADN-ului exogen.

Testele VERACITY nu pot evidenția:

• translocații cromozomiale echilibrate și alte anomalii cromozomiale structural decât cele menționate mai sus
• poliploidii
• mozaicisme cromozomiale fetale și/sau placentare în procent mic (adică prezența a două linii celulare cu un set diferit de cromozomi, cu o linie celulară slab reprezentată)
• defecte de metilare a ADN-ului^6;7.

Bibliografie

1. The American College of Obstetricians and Gynecologists. The Society for Maternal-Fetal Medicin. Commitee Opinion: Noninvasive Prenatal Screening for Fetal Aneuploidy. Number 545, December 2012. www.acog.org.
2. Lo YMD, Corbetta N, Chamberlain PF, Rai V, Sargent IL, Redman CWG, Wainscoat JS. Presence of fetal DNA in maternal plasma and serum. Lancet 1997; 350:485-487
3. SmidM, Lagona F, de Benassuti L, Ferrari A, Ferrari M, Cremonesi L. Evaluation of different approaches for fetal DNA analysis from maternal plasma and nucleated blood cells. Clin Chem1999; 45:1570-1572.
4. Houfflin-DebargeV, O’Donnell H, Overton T, Bennett PR, Fisk NM. High sensitivity of fetal DNA in plasma compared to serum and nucleated cells using unnested PCR in maternal blood. Fetal Diagn Ther 2000; 15:102-107.
5. Lo YMD. Fetal DNA in Maternal Plasma: Biology and Diagnostic Applications. Clin Chem. 2000 Dec;46(12):1903-6.
6. https://www.nipd.com/veracity/
7. Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.