Page 389 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 8
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOCHIMIE

8.1.31 Electroforeza proteinelor serice cu imunofixare
Informaţii generale
Electroforeza proteinelor cu imunofixare (IFE) combină separarea electroforetică a proteinelor cu
imunoprecipitarea, folosind antiseruri monospecifice faţă de lanţurile grele şi uşoare individuale.
Astfel, se obţin rezultate rapide, uşor de interpretat. În timp ce apariţia componentelor policlonale
se datorează activităţii mai multor tipuri de clone de limfocite B, gamapatiile monoclonale rezultă ca
urmare a proliferării unei singure clone celulare B .
2
Recomandări pentru efectuarea IFE - evaluarea componentelor monoclonale depistate la
electroforeza proteinelor serice; evaluarea amiloidozei, a bolilor limfoproliferative, colagenozelor, a
condiţiilor asociate cu deficit imun sau disgamaglobulinemii 3;4
Pregătire pacient - à jeun (pe nemâncate) sau postprandial . 2
Specimen recoltat - a) sânge venos ; b) urina din 24 ore . 2
2
Recipient de recoltare - a) vacutainer fără anticoagulant cu/fără gel separator ; b) eprubetă pentru
2
urină . 2
Prelucrare necesară după recoltare 2
Se separă serul prin centrifugare. În funcţie de procentul benzii care apare la electroforeza proteinelor
serice în domeniul γ, sau mai rar β, se fac anumite diluţii din probele de ser, şi anume:
Procent estimat de component Dilutie IgG, IgA, IgM Dilutie k, λ
monoclonal
< 5 1 : 2 1 : 2
<10 1 : 10 1 : 5
<20 1 : 20 1 :10
Urina se pipetează ca atare, după ce în prealabil se concentrează în dispozitive speciale.
Volum probă - a) minim 1 mL ser; b) un eşantion de 10 mL . 2
Cauze de respingere a probei - ser hemolizat .
2
Stabilitatea probei - a) serul separat este stabil maxim 4 zile la temperatura camerei şi 2 săptămâni
la 2-8°C ; b) urina este stabilă 1 lună la 2-8°C .
2
2
Principiul metodei - se bazează pe vizualizarea pe gel a benzilor corespunzătoare proteinelor
specifice, prin formarea complexului antigen-anticorp, după separarea fracţiilor prin electroforeză.
Stripurile de IFE sunt din gel agar şi au şase “picioruşe”: primul este alocat proteinelor totale care se
separă în urma migrării electroforetice, celelalte sunt tratate cu antiseruri care se leagă specific de
imunoglobulinele umane IgG, IgA, IgM – lanţuri grele, şi k, λ - lanţuri uşoare .
2
Valori de referinţă
Probele de ser/ urină normale nu conţin componentă monoclonală.
Un component monoclonal produce pe gel o bandă distinctă îngustă - tipic unei gamapatii monoclonale
- în timp ce imunoglobulinele policlonale formează o “zonă” difuză de precipitare cu antiserurile
specifice.
În cazul gamapatiilor oligoclonale se obţin cel puţin trei benzi înguste (o bandă discretă corespunzătoare
unui lanţ greu şi două benzi corespunzătoare ambelor tipuri de lanţuri uşoare) .
5
Se compară locaţia benzilor imunofixate cu banda de referinţă de pe “picioruşul” corespunzător

389