Page 267 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 18
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

L/L (de referinţă).
Această clasificare a alelelor HLA-DRB1 ar putea contribui la descifrarea componentei genetice a PR
dacă diferenţele semnificative dintre genotipuri vor fi corelate cu mecanisme fiziopatologice distincte.
Studii recente au indicat că asocierea epitop comun-PR este limitată la artrita reumatoidă cu anticorpi
anti-CCP pozitivi.
În concluzie, evidenţierea epitopului comun este asociată cu un risc crescut de dezvoltare a PR şi
poate ajuta diagnosticul în faza precoce a bolii. Prezenţa unui “shared epitope” este mai ales un
marker prognostic pentru evoluţia şi severitatea bolii, deoarece progresia rapidă şi severă a eroziunii
articulare se corelează cu statusul HLA-DRB1 şi tipul epitopului. A fost demonstrat şi un efect de
doză-genă: pacienţii care au 2 alele ce codifică un epitop comun prezintă o evoluţie mai severă decât
pacienţii purtători ai unei singure alele sau a nici uneia. În special epitopii comuni de pe alelele
DR4 sunt predictivi pentru o formă progresivă şi distructivă de boală, cu manifestări extraarticulare.
Genotipul HLA-DRB1*0401/0401 este asociat cu sindromul Felty.
Referitor la terapia medicamentoasă, s-a demonstrat că pacienţii homozigoţi pentru DR4-shared
epitope sau pacienţii cu 2 alele ce codifică un epitop comun răspund mai bine la etanercept (sau la alţi
agenţi biologici) decât la metotrexat.
Testul efectuat în laboratorul nostru permite:
- tipajul alelelor HLA-DRB1: DRB1*01 (DR1), DRB1*04 (DR4) şi DRB1*1001, printr-o tehnică
de rezoluţie joasă;
- diferenţierea alelelor HLA-DRB1*01 şi DRB1*04 în alele pozitive sau negative pentru
“shared epitope”, printr-o tehnică de înaltă rezoluţie;
- tipajul secvenţelor de aminoacizi din “shared epitope”: QKRAA, QRRAA sau RRRAA;
- precizarea statusului heterozigot sau homozigot pentru “shared epitope” .
4
Recomandări pentru efectuarea testului
- identificarea şi diferenţierea cazurilor clinic incerte de PR;
- stabilirea prognosticului bolii la pacienţii diagnosticaţi cu PR;
- identificarea pacienţilor cu risc de a dezvolta PR pentru ca la apariţia manifestărilor clinice să se
intervină terapeutic precoce şi agresiv (alegerea/optimizarea terapiei) .
4
Pregătire pacient - nu este necesară o pregătire specială .
4
Specimen recoltat - sânge venos . 4
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant .
4
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
4
Cauze de respingere a probei - folosirea heparinei ca anticoagulant; probe coagulate sau hemolizate;
probe refrigerate sau congelate .
4
Stabilitate probă - 7 zile la 2-8ºC . 4
Metodă - reacţie de polimerizare în lanţ (PCR) urmată de analiza produşilor de amplificare prin revers-
hibridizare pentru detectarea epitopului comun QKRAA/QRRAA/RRRAA .
4
Valori de referinţă şi interpretarea rezultatelor
Epitop comun QKRAA/QRRAA/RRRAA: Negativ.
În cazul unui rezultat pozitiv se va comunica dacă este vorba de o singură alelă sau de 2 alele care
codifică un epitop comun; se va preciza de asemenea tipul alelelor HLA-DRB1 .
4
267