Page 166 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

7 TESTE DE HEMATOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

de sânge este întinsă pe suprafaţa lamei/lamelei şi este uscată la aer. Frotiurile efectuate pe lamele
asigură o distribuţie uniformă a sângelui pe suprafaţa lamelei; pe de altă parte lamele de sticlă sunt mai
puţin fragile, fiind mai uşor de manevrat şi etichetat, dar prezintă o incidenţă crescută de acumulare a
leucocitelor de dimensiuni mari pe marginile frotiului şi în franjuri.
Un frotiu de calitate acceptabilă trebuie să fie de ~3 cm lungime, 2 cm lăţime, întins uniform, cu o
margine de franjuri scurtă (<0.3 cm), o arie de citire în mijloc de 1-1.5 cm şi o arie groasă de lungime
similară la celălalt capăt.
După uscare frotiurile sunt fixate cu metanol anhidru şi colorate May-Grunwald-Giemsa. Colorantul
conţine albastru de metilen (convertit la azur metilen cu acid bicromat) şi eozină. Azur metilen este un
colorant bazic care colorează în albastru-violet componentele celulare acide (acizi nucleici, proteine),
iar eozina reacţionează cu elementele celulare bazice conferind tentă roz-roşiatică componentelor
citoplasmatice şi hemoglobinei. În funcţie de proprietăţile lor granulaţiile leucocitare se colorează diferit
permiţând analiza lor morfologică: granulaţiile neutrofilelor sunt uşor bazice şi se colorează slab cu
componentul azurofil, granulaţiile eozinofilelor conţin un derivat puternic bazic şi se colorează intens
cu eozină, iar granulaţiile bazofilelor conţin predominant proteine acide şi se colorează în albastru
închis-violet .
4;5
Stabilitate probă - frotiurile efectuate din tuburile pentru hemogramă trebuie efectuate în primele 2-3
ore de la recoltare. Frotiurile fixate în metanol sunt stabile necolorate cel puţin 1 an fără scăderea
calităţii .
1;4
Cauze de respingere a probei - vezi hemograma. Sunt de asemenea neadecvate examinării frotiurile
prea groase /prea subţiri, frotiurile efectuate pe lame de sticlă care nu au franjuri, frotiurile incorect
colorate/cu precipitate de colorant .
4
Metodă - examinare microscopică, iniţial la putere mică (cu obiectivul de 10x/20x) pentru aprecierea
coloraţiei şi distribuţiei celulare; de asemenea se poate face o estimare a numărului de leucocite,
precum şi a prezenţei de elemente celulare anormale (blaşti, eritroblaşti), agregate trombocitare,
aglutinate eritrocitare/rulouri. Apoi frotiul se examinează cu obiectivul de 100x cu imersie, fiecare tip
celular find evaluat pentru anomalii cantitative şi calitative 4;5;6 .
Valori de referinţă - absente anomalii morfologice .
4
Semnificaţie clinică
I. Aprecierea eritrocitelor pe frotiu: eritrocitele sunt evaluate pentru variaţii de mărime, formă, distribuţia
hemoglobinei şi prezenţa de incluzii intracelulare. Examinarea optimă a morfologiei eritrocitare se face
într-o arie a frotiului în care hematiile sunt aşezate una lângă alta, dar nu se suprapun. În mod normal
eritrocitele apar de formă rotundă, anucleate, uniforme ca mărime şi formă, cu un diametru mediu de
7-8 µm (comparabil cu nucleul unui limfocit mic), cu o zonă palidă centrală care nu depăşeşte 1/3 din
diametrul celulei, înconjurată de o ramă roşu-portocalie de hemoglobină .
5

Anomalii morfologice eritrocitare 1;3;5;9
Anomalie morfologică Descriere Boli asociate
Variaţia anormală a mărimii Vezi hemograma: RDW
1. Anizocitoză eritrocitelor crescut

166