Page 93 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 5
AL LABORATOARELOR SYNEVO METODE DE LUCRU

ELISA de tip “sandwich” ELISA de tip “sandwich”

+ + +

Faza Antigen Conjugat Complexul Substrat Produs final de reacĠie galben
solidă cu enzimă “sandwich” albastru
Fig.5.3.1

Metoda ELISA de tip competitiv constă în următoarele etape (vezi figura 5.3.2): interiorul microplacii
este învelit cu o concentraţie atent titrată de anticorpi; Ag din proba şi Ag marcat cu enzima din
conjugat “concurează” într-o singură reacţie pentru numărul limitat de situsuri de pe Ac imobilizaţi;
după îndepărtarea conjugatului se adaugă substratul cromogenic; produsul colorat rezultat în urma
reacţiei este invers proporţional cu cantitatea de Ag din probă .
1
ELISA de tip competitiv ELISA de tip competitiv

+ +

Faza Antigen Conjugat Complex anticorp-antigen-enzimă Substrat Complex Produs final
solidă cu enzima albastru anticorp- de reacĠie
antigen- galben
enzimă
Fig.5.3.2
Tehnica ELFA (Enzyme-Linked Fluorescent Assay) asociază metoda ELISA cu o citire finală a
rezultatului în fluorescenţă albastră. În laboratorul Synevo această tehnică automatizată este folosită
pentru determinarea Ac anti-Toxoplasma IgG cantitativ, anti-Citomegalovirus IgM precum şi a avidităţii
anticorpilor anti-Toxoplasma IgG . O menţiune specială trebuie făcută în legătură cu testul de aviditate,
2
care este o metodă ce permite diferenţierea unei infecţii recente cu Toxoplasma gondii de o infecţie
mai veche. Termenul “aviditate” sau “afinitate funcţională” se referă la o populaţie de anticorpi şi
defineşte forţa netă de legare a antigenului. Aviditatea anticorpilor IgG este scăzută în cursul infectiei
primare, dar creşte treptat în decurs de săptămâni sau luni, ca urmare a selectării celulelor B capabile
să producă imunoglobuline specifice. Demonstrarea prezenţei anticorpilor IgG cu aviditate crescută

93