Page 148 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1
P. 148

7.5 Teste de trombofilie
                                                   7.5.1 Anticoagulant lupic

                  InformaŃii generale
                  AnticoagulanŃii de tip lupic sunt anticorpi îndreptaŃi împotriva complexelor fosfolipide-proteine. Aceştia interferă in vitro
                  cu testele de coagulare dependente de fosfolipide, determinând prelungirea lor (cel mai frecvent folosit fiind timpul
                                         2;3
                  parŃial de tromboplastină APTT) .
                                                                                                      3
                  In vivo, prezenŃa anticogulanŃilor de tip lupic  se asociază  cu un risc crescut de evenimente trombotice (trombofilie) .
                  PrevalenŃa  trombozelor  la  pacienŃii  cu  anticoagulanŃi  lupici  este  de  24-36%;  predomină  trombozele  profunde  ale
                  membrelor şi embolismul pulmonar.
                  Datorită heterogenităŃii intrinseci a anticoagulanŃilor lupici diagnosticul de laborator este adesea dificil. Testele folosite
                  trebuie să fie capabile să distingă  anticorpii cu activitate de lupus anticoagulant de anticorpii anti-factori de coagulare,
                  deficitul de factori şi heparină, deoarece toate aceste patru condiŃii pot cauza prelungirea testului APTT. În practică,
                  plasmele cu deficit de factori de coagulare sunt uşor de identificat, deoarece adăugarea plasmei normale normalizează
                  in vitro timpul de coagulare. Cu toate acestea, testul APTT izolat nu poate diferenŃia cu certitudine plasmele care conŃin
                  anticoagulanŃi lupici de cele care conŃin anticorpi anti-factori de coagulare şi/sau heparină .
                                                                                  1
                  Testul  efectuat  în  laboratorul  nostru  este  destinat  detecŃiei  calitative  a  anticogulanŃilor  lupici  printr-o  tehnică  de
                  neutralizare cu fosfolipide purificate în fază hexagonală.
                  Avantajul  acestui  test  constă  în  faptul  că  cei  mai  mulŃi  anticorpi  cu  activitate  de  lupus  anticoagulant  recunosc
                  fosfolipidele cu configuraŃie hexagonală drept epitopi antigenici. Adăugarea acestui tip de fosfolipide la amestecul de
                  reacŃie ajută la neutralizarea efectelor inhibitorii cauzate de anticogulantul lupic şi nu neutralizează anticorpii anti-factori
                  specifici. Adăugarea plasmei normale serveşte la corectarea oricărei prelungiri APTT datorate unui posibil deficit de
                  factori de coagulare. Sistemul de testare conŃine de asemenea şi un inhibitor de heparină, astfel încât concentraŃiile
                  plasmatice de heparină <1UI/ml nu influenŃează rezultatele obŃinute .
                                                                  1
                  Recomandări pentru determinarea anticoagulantului lupic
                  Aceşti anticorpi pot apărea în absenŃa unei boli de sistem (sindrom antifosfolipidic primar) sau se pot asocia cu boli
                  autoimune  (în  special  LES),  infecŃii  virale,  boli  mieloproliferative,  unele  medicamente  :  hidralazină,  clorpromazină,
                  chinidină şi streptomicină .
                                    3
                  Pacientele cu avorturi spontane recurente prezintă anticoagulanŃi lupici în aproximativ 10% din cazuri.
                  Pregătire pacient - la pacienŃii aflaŃi sub tratament cu heparină recoltarea  probei de sânge trebuie efectuată după 48
                                          1
                  ore de la ultima doză administrată .
                  Specimen recoltat - sânge venos .
                                           1
                  Recipient de recoltă - vacutainer cu citrat Na 0.105 M (1/9), capac bleu/verde.
                  Deoarece separarea plasmei trebuie să se efectueze cât mai repede posibil nu vom primi probe decât din punctele de
                  recoltare care pot asigura un transport al probei în după-amiaza aceleiaşi zile .
                                                                         1
                                                 1
                  Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
                  Cauze de respingere a probei - probă în cantitate inadecvată (sub nivelul indicat pe vacutainer); specimen hemolizat
                                        1
                  ; prezenŃă de coaguli în probă .
                  Prelucrare necesară după recoltare - centrifugare 15 min. la 2500 g pentru obŃinerea plasmei . Plasma trebuie să fie
                                                                                      1
                                               2
                  foarte săracă în trombocite (< 10 000/µL) . Dacă testul nu poate fi efectuat imediat, plasma va fi congelată .
                                                                                             1;2
                  Stabilitate probă – plasma separată este stabilă 4 ore la temperatura camerei;1 lună la -20°C .
                                                                                     1
                  Metodă - neutralizare cu fosfolipide purificate în faza hexagonală .
                                                                1
                  Valori de referinŃă - anticoagulant lupic negativ .
                                                    1
                  MenŃiune: Pentru diagnosticul de sindrom antifosfolipidic sunt semnificative 2 rezultate pozitive obŃinute la interval de
                  12 săptămâni 1;2;3 .
                  Limite şi interferenŃe
                  Nivelurile  de  heparină  >1  UI/mL  pot  produce  interferenŃe,  de  aceea  se  recomandă  ca  recoltarea  de  sânge  să  se
                  efectueze după 48 ore de la ultima administrare de heparină. Testul poate fi folosit la pacienŃii aflaŃi sub tratament cu
                  anticoagulante orale, deşi este preferabil să se evite acest lucru .
                                                               1


                                                         Bibliografie

                     1.   Laborator Synevo. ReferinŃele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2006 Ref Type: Catalog
                     2.   Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. www.labcorp.com  2006.
                        Ref Type: Internet Communication
                     3.   Lothar Thomas. Haemostasis. In Clinical Laboratoty Diagnostics, 1998, 636-638.
   143   144   145   146   147   148   149   150   151   152   153