Page 148 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1
P. 148
7.5 Teste de trombofilie
7.5.1 Anticoagulant lupic
InformaŃii generale
AnticoagulanŃii de tip lupic sunt anticorpi îndreptaŃi împotriva complexelor fosfolipide-proteine. Aceştia interferă in vitro
cu testele de coagulare dependente de fosfolipide, determinând prelungirea lor (cel mai frecvent folosit fiind timpul
2;3
parŃial de tromboplastină APTT) .
3
In vivo, prezenŃa anticogulanŃilor de tip lupic se asociază cu un risc crescut de evenimente trombotice (trombofilie) .
PrevalenŃa trombozelor la pacienŃii cu anticoagulanŃi lupici este de 24-36%; predomină trombozele profunde ale
membrelor şi embolismul pulmonar.
Datorită heterogenităŃii intrinseci a anticoagulanŃilor lupici diagnosticul de laborator este adesea dificil. Testele folosite
trebuie să fie capabile să distingă anticorpii cu activitate de lupus anticoagulant de anticorpii anti-factori de coagulare,
deficitul de factori şi heparină, deoarece toate aceste patru condiŃii pot cauza prelungirea testului APTT. În practică,
plasmele cu deficit de factori de coagulare sunt uşor de identificat, deoarece adăugarea plasmei normale normalizează
in vitro timpul de coagulare. Cu toate acestea, testul APTT izolat nu poate diferenŃia cu certitudine plasmele care conŃin
anticoagulanŃi lupici de cele care conŃin anticorpi anti-factori de coagulare şi/sau heparină .
1
Testul efectuat în laboratorul nostru este destinat detecŃiei calitative a anticogulanŃilor lupici printr-o tehnică de
neutralizare cu fosfolipide purificate în fază hexagonală.
Avantajul acestui test constă în faptul că cei mai mulŃi anticorpi cu activitate de lupus anticoagulant recunosc
fosfolipidele cu configuraŃie hexagonală drept epitopi antigenici. Adăugarea acestui tip de fosfolipide la amestecul de
reacŃie ajută la neutralizarea efectelor inhibitorii cauzate de anticogulantul lupic şi nu neutralizează anticorpii anti-factori
specifici. Adăugarea plasmei normale serveşte la corectarea oricărei prelungiri APTT datorate unui posibil deficit de
factori de coagulare. Sistemul de testare conŃine de asemenea şi un inhibitor de heparină, astfel încât concentraŃiile
plasmatice de heparină <1UI/ml nu influenŃează rezultatele obŃinute .
1
Recomandări pentru determinarea anticoagulantului lupic
Aceşti anticorpi pot apărea în absenŃa unei boli de sistem (sindrom antifosfolipidic primar) sau se pot asocia cu boli
autoimune (în special LES), infecŃii virale, boli mieloproliferative, unele medicamente : hidralazină, clorpromazină,
chinidină şi streptomicină .
3
Pacientele cu avorturi spontane recurente prezintă anticoagulanŃi lupici în aproximativ 10% din cazuri.
Pregătire pacient - la pacienŃii aflaŃi sub tratament cu heparină recoltarea probei de sânge trebuie efectuată după 48
1
ore de la ultima doză administrată .
Specimen recoltat - sânge venos .
1
Recipient de recoltă - vacutainer cu citrat Na 0.105 M (1/9), capac bleu/verde.
Deoarece separarea plasmei trebuie să se efectueze cât mai repede posibil nu vom primi probe decât din punctele de
recoltare care pot asigura un transport al probei în după-amiaza aceleiaşi zile .
1
1
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
Cauze de respingere a probei - probă în cantitate inadecvată (sub nivelul indicat pe vacutainer); specimen hemolizat
1
; prezenŃă de coaguli în probă .
Prelucrare necesară după recoltare - centrifugare 15 min. la 2500 g pentru obŃinerea plasmei . Plasma trebuie să fie
1
2
foarte săracă în trombocite (< 10 000/µL) . Dacă testul nu poate fi efectuat imediat, plasma va fi congelată .
1;2
Stabilitate probă – plasma separată este stabilă 4 ore la temperatura camerei;1 lună la -20°C .
1
Metodă - neutralizare cu fosfolipide purificate în faza hexagonală .
1
Valori de referinŃă - anticoagulant lupic negativ .
1
MenŃiune: Pentru diagnosticul de sindrom antifosfolipidic sunt semnificative 2 rezultate pozitive obŃinute la interval de
12 săptămâni 1;2;3 .
Limite şi interferenŃe
Nivelurile de heparină >1 UI/mL pot produce interferenŃe, de aceea se recomandă ca recoltarea de sânge să se
efectueze după 48 ore de la ultima administrare de heparină. Testul poate fi folosit la pacienŃii aflaŃi sub tratament cu
anticoagulante orale, deşi este preferabil să se evite acest lucru .
1
Bibliografie
1. Laborator Synevo. ReferinŃele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2006 Ref Type: Catalog
2. Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. www.labcorp.com 2006.
Ref Type: Internet Communication
3. Lothar Thomas. Haemostasis. In Clinical Laboratoty Diagnostics, 1998, 636-638.