Page 76 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

7.1.2 Concentrat leucocitar

InformaŃii generale
DetecŃia unor elemente patologice posibil prezente în sângele periferic poate fi mărită prin prepararea unei fracŃiuni
concentrate a elementelor nucleate sanguine (“buffy coat”). Când este prezent doar un număr mic de celule imature sau
elemente celulare anormale, acestea pot să nu fie detectate pe frotiul de sânge obişnuit, concentratul leucocitar putând fi de
ajutor în identificarea lor.
Recomandări pentru determinarea concentratului leucocitar
- pancitopenia fără o cauză aparentă: detecŃia de celule imature sau anormale;
- leucemia leucopenică: detecŃia de blaşti;
- tablou leucoeritroblastic: identificarea de precursori mieloizi, eritroblaşti, fragmente de megakariocite.
- anemie macrocitară (megaloblastică): identificarea de megaloblaşti (precursori eritroizi nucleaŃi) şi granulocite
hipersegmentate;
- mielom multiplu: prezenŃă de plasmocite.
- hairy cell leukemia: identificarea de celule păroase.
- atunci când se suspectează prezenŃa de celule tumorale circulante (limfoame în fază leucemică).
3
- prezenŃa de paraziŃi sau bacterii intraleucocitare .
2
Pregătire pacient - à jeun/postprandial .
2
Specimen recoltat - sânge venos .
Recipient de recoltare - vacutainer cu K3-EDTA .
2
Cantitate recoltată - 2 tuburi (cât permite vacuumul) .
2
2
Cauze de respingere a probei - tub incorect, specimen coagulat/hemolizat .
Prelucrare necesară după recoltare - se aşează tuburile într-un stativ în poziŃie verticală şi se lasă la temperatura camerei 2-
3 ore, timp în care elementele celulare sanguine sedimentează separându-se de plasmă. Se adună cu o pipetă plasma
supernatantă împreună cu stratul leuco-trombocitar situat deasupra stratului eritrocitar şi o mică porŃiune din stratul eritrocitar.
Se trece plasma colectată într-o eprubetă şi se centrifughează 10 minute la 2000 rpm, leucocitele şi trombocitele depunându-
se pe fundul eprubetei. Se îndepărtează plasma supernatantă cu excepŃia unei mici cantităŃi care va servi ca diluant al
2
sedimentului din care se vor întinde frotiurile ce vor fi colorate May-Grunwald-Giemsa .
Stabilitate probă - frotiurile trebuie efectuate cât mai repede după recoltare (primele 2-3 ore); frotiurile fixate în metanol sunt
stabile necolorate cel puŃin 1 an fără scăderea calităŃii .
2
Metoda de determinare - examinare microscopică iniŃial la putere mică (obiectivul de 20x), apoi cu obiectivul de 100x cu
imersie. Se examinează cu atenŃie marginile şi franjurii frotiului unde se dispun adesea precursorii mieloizi (mielocite,
promielocite, blaşti) şi eritroblaştii 1;2;3 .
Valori de referinŃă - absente elemente celulare anormale .
2
SemnificaŃie clinică - pe lamele de concentrat leucocitar pot fi prezente celule sanguine care nu apar în mod obişnuit in
1;2
formula leucocitară curentă, cum ar fi: mielocite, metamielocite . Pe lamele de concentrat leucocitar nu se pot aprecia cu
acurateŃe morfologia eritrocitară, numărul de trombocite şi formula leucocitară. Uneori se poate observa un număr mai mare
de monocite. Totuşi frotiurile de concentrat leucocitar bine efectuate sunt reprezentative pentru populaŃia generală de celule
nucleate prezentă în sânge. În cazurile cu leucopenie se pot examina într-un timp scurt mult mai multe celule decât pe frotiul
obişnuit. Identificarea de celule imature, celule anormale, blaşti, celule tumorale circulante sau alte forme nucleate circulante,
precum şi bacterii sau paraziŃi intraleucocitari (organisme neobişnuite, cum ar fi infecŃii severe cu Strongyloides stercoralis la
pacienŃi imunodeprimaŃi, microfilarii) furnizează informaŃii diagnostice importante şi poate reduce necesitatea altor teste mai
complexe .
1
Limite şi interferenŃe - prepararea frotiurilor de concentrat leucocitar poate determina distorsiuni celulare, în special ale
1
celulelor fragile (vezi şi limite şi interferenŃe ale frotiului de sânge) .

Bibliografie

1. DeMott W, Tilzer L, Hematology. In Laboratory Test Handbook, 3 rd Edition, Hudson (Cleveland), 1994, 526-527.
2. Metode curente pentru analize de laborator clinic, Ministerul SănătăŃii, Academia de ŞtiinŃe Medicale, Editura Medicală, 1982: 46-47.
3. Shafer J, Canadian Society of Laboratory Technologist Congress, Winnipeg, Manitoba, June 16 to 20, 1996, WorkshopManual, p159-161.