Page 342 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

legătură fosfat diesterică 5’–3’ necesară continuării elongaţiei lanţului de ADN viral. Prin urmare
sinteza ADN-lui viral este oprită, proces denumit “chain termination”.
În cazul NRTIs este necesară activarea lor intracelulară prin adiţia a trei grupări fosfat la nucleul
dezoxiribozei (5’), transformându-se în NRTIs trifosfaţi. Această etapă este realizată cu ajutorul unei
kinaze celulare. NtRTIs sunt deja fosforilati şi aceasta constituie avantajul lor.
ADN-ul care codifică polimeraza HBV este un ORF căruia i se descriu 4 regiuni: o proteină terminală
pentru iniţierea replicării HBV, o regiune “spacer” cu rol neprecizat, o regiune cu funcţie de revers-
transcriptază (ADN polimeraza) denumită “Pol(rt)”, pentru replicarea virală şi o regiune ribonucleazică,
denumită “RNase H”, pentru degradarea ARN pregenomic. Regiunea revers-transcriptazei (rt1-rt344)
este împărţită în 7 domenii, de la A la G (vezi fig 18.3.8.4).
3

Fig. 18.3.8.4: Mutaţiile asociate cu rezistenţa la tratamentul antiviral cu analogi nucleozidici şi
nucleotidici sunt localizate la nivelul ORF-ului care codifică polimeraza HBV. Polimerazei VHB i
se descriu 4 regiuni: proteina terminală, „spacer”, „Pol(rt)” şi “RNase H”. Domeniile cu cele mai
frecvente astfel de mutaţii sunt B,C şi D ale regiunii Pol(rt).
(Adaptare după Watcharasak Chotiyaputta and Anna S. F. Lok, „Hepatitis B virus variants”, Nature
Reviews-Gastroenterology & Hepatology. August 2009; Volume 6:453-462).

Mutantele VHB asociate cu rezistenţa la Lamivudină (LAM)
Mutaţia centrală asociată cu rezistenţa la LAM vizează zona catalitică a regiunii Pol(rt) a HBV
polimerazei, mai precis secvenţa tirozină-metionină-aspartat-aspartat (YMDD). Această mutaţie
implică substituţia metioninei cu valina sau cu izoleucina în poziţia 204 a secvenţei YMDD: rtM204V
sau rtM204I. Această mutaţie scade susceptibilitatea (sensibilitatea) HBV pentru LAM de cca 1000 ori.
Scade, de asemenea, şi capacitatea virală de replicare; însă pot fi selectate adesea o serie de mutaţii
compensatorii (de exemplu substituţia valinei cu leucina în poziţia 173, rtV173L) care restabilesc
capacitatea virală de replicare în cursul tratamentului continuu, prelungit.
Mai sunt descrise mutaţiile rtM204S (în domeniul C) şi rtA181T (în domeniul B) . 3

342