Page 584 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

21 TESTE DE MICROBIOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

21.7.3 Examenul microbiologic al lichidelor de puncţie
(lichide pleurale, peritoneale, pericardice şi articulare)

Informaţii generale
Exsudatele şi transsudatele cavităţilor închise reprezintă reacţia de tip inflamator sau neinflamator
a seroaselor respective faţă de anumiţi excitanţi, care duce la acumularea de lichid în exces între
membrana viscerală şi parietală.
Procesele inflamatorii au la bază o varietate de condiţii etiologice. În marea majoritate a cazurilor,
acestea sunt infecţii locale, rezultate din procesele inflamatorii ale organului respectiv sau a celor
din vecinătate, traumatisme infectante sau pot să reprezinte o localizare a unor boli generale de
tip septicemic. În mod normal acestea sunt arii sterile din punct de vedere microbiologic, dar pot fi
infectate de toate cele patru categorii de microorganisme: bacterii, fungi, virusuri şi paraziţi .
1
Rezultatul investigaţiilor microbiologice depinde de calitatea recoltării şi transportul probelor . În
2
cadrul laboratorului Synevo lichidele de puncţie pot fi procesate atât în sistem clasic, cât şi în sistem
automat.
Pentru sistemul automat recoltarea se face la patul bolnavului direct în flacoanele ce asigură condiţii
aerobe şi anaerobe şi sunt transportate imediat la laborator . 1
Metoda clasică necesită concentrarea lichidului de puncţie prin centrifugare într-o eprubetă sterilă, 15
minute la 3500 rotaţii/minut .
3
În cazul prezenţei coagulului în lichidul recoltat, acesta se omogenizează pentru a elibera bacteriile .
1
După centrifugare supernatantul este colectat într-un tub steril, iar sedimentul este folosit pentru
frotiuri şi culturi bacteriene.
Pentru realizarea frotiurilor se folosesc lame curate, degresate, de preferinţă noi pentru a avea
siguranţa că nu au bacterii restante de la examinari anterioare. Sedimentul se întinde din centrul lamei
spre periferie cu ansa sau cu pipeta Pasteur pentru a obţine un strat continuu de celule. Se prepară 4
frotiuri, din care 2 vor fi fixate şi colorate Gram şi respectiv albastru de metilen, un frotiu va fi colorat
Giemsa şi unul va rămâne de rezervă . 3
Pe frotiul colorat Gram se evidenţiază prezenţa germenilor, morfologia, tinctorialitatea, frecvenţa şi
localizarea lor (intra sau extraleucocitari).
Lamele colorate Giemsa şi albastru de metilen se utilizează pentru examenul citologic. Se apreciază
procentual tipul elementelor: PMN, limfocite, notându-se în acelaşi timp aspectul lor.
Cultivarea este un mijloc de diagnostic specific, dar necesită 24 – 48 de ore şi poate fi negativă în
cazul germenilor neviabili sau dacă pacientul a început tratamentul antibiotic.
Se pot folosi: agar Columbia cu 5% sânge de berbec, agar chocolate, geloză lactozată şi bulion
thioglycolat. În funcţie de examenul bacterioscopic, pot fi adăugate şi alte medii (Sabouraud).
Mediile sunt incubate la 37°C, eventual în atmosfera cu 5% CO pentru medii ca agar Columbia cu 5%
2
sânge de berbec şi agar chocolate.
Apariţia culturii este urmărită zilnic timp de 3 zile pe mediile solide şi 5 zile în tubul cu bulion
thioglycolat .
1;3
În cazul culturilor pozitive se continuă identificarea până la nivel de specie şi se efectuează

584