Page 119 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

7.2 ReacŃii citochimice

Citochimia se bazează pe studiul microscopic al componenŃilor chimici celulari: nucleoproteine, proteine, hidraŃi de
carbon, lipide şi enzime.
ColoraŃiile citochimice oferă informaŃii în legătură cu linia celulară şi diferenŃierea celulelor hematopoietice şi joacă un
rol important în evaluarea anomaliilor hematologice, în special în diagnosticul diferenŃial şi clasificarea bolilor maligne
ale sângelui.
Un principiu de care trebuie Ńinut seama este faptul că, o reacŃie pozitivă este întotdeauna valoroasă, în timp ce reacŃia
negativă este neconcludentă. Pentru certitudine, în majoritate cazurilor reacŃiile citochimice se practică cu un martor
1;2
pozitiv al reacŃiei .

ReacŃii LAM – LAM – LAM – LAM –
citochimic M1,M2 LAM – M3 M4 M5 M6 LAM – M7 LAL
e

MPO + ++ + - , +/- - - -

PAS - , +/- - , + - , +/- - , + + + - , + , ++

ANAE - - , + + ++ + + - , +/-

- negativ ; +/- slab pozitiv ; + pozitiv ;+ + intens pozitiv.
Un diagnostic corect de laborator al LAM, cu subtipurile FAB şi LAL necesită coroborarea datelor de microscopie
optică - morfologie şi coloraŃii citochimice - cu imunofenotiparea, eventual datele de microscopie electronică.

7.2.1 Mieloperoxidaza

InformaŃii generale
ReacŃia MPO este coloraŃia citochimică de elecŃie pentru recunoaşterea celulelor granulocitare, prezenŃa sa
reprezentând singurul marker fără echivoc al diferenŃierii mieloide. Mieloperoxidaza este o enzimă localizată în
4
granulaŃiile azurofile ale celulelor seriilor granulocitare şi monocitare şi în granulaŃiile specifice ale eozinofilelor .
Principiul reacŃiei
Peroxidazele celulare descompun apa oxigenată şi eliberează oxigenul, care oxidează benzidina şi generează un
compus brun-auriu insolubil şi stabil, localizat în citoplasma celulelor peroxidazo-pozitive .
1;3
Recomandări pentru determinarea activităŃii peroxidazei
- diferenŃierea leucemiei acute mieloblastice (LAM) de cea limfoblastică (LAL);
- demonstrarea corpilor Auer;
- detectarea scăderii activităŃii, la subiecŃii cu deficit de MPO congenitală sau dobândită (în mielodisplazii) .
1
3
Pregătire pacient - à jeun (pe nemâncate) sau postprandial (după mese) .
Specimen recoltat
a) sânge capilar şi/sau aspirat medular - frotiuri
3
b) se recomandă recoltarea simultană de sânge venos pentru hemogramă .
Cauze de respingerea probei
- frotiuri nefixate în maxim 8 ore de la recoltare;
3
- frotiuri executate din sânge recoltat pe EDTA .
Recipient de recoltare
a) se execută frotiuri de sânge capilar direct pe lame de microscopie;
b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemogramă .
3
Cantitate recoltată
a) 3-5 frotiuri;
b) 2 mL .
3