Page 123 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

- diferenŃierea formelor stabile, benigne de hairy cell leukemia (HCL) cu FAL normal, de formele active de boală, cu
neutropenie severă şi FAL mult crescut 1;3;6 .
Principiul reacŃiei
Fosfataza alcalină leucocitară catalizează reacŃia de hidroliză a esterilor fosfaŃi în mediu alcalin.1-naftolul rezultat din
1-naftil-fosfat se cuplează cu o sare de diazoniu, formând precipitate brune, în funcŃie de localizarea şi activitatea
1,3
fosfatazei alcaline în celule. Intensitatea şi frecvenŃa granulelor se evaluează prin examen microscopic .
3
Pregătire pacient - à jeun (pe nemâncate) sau postprandial (după mese) .
Specimen recoltat
a) sânge capilar şi/sau aspirat medular - frotiuri
3
b) se recomandă recoltarea simultană de sânge venos pentru hemogramă .
Cauze de respingerea probei
- frotiuri nefixate în maxim 8 ore de la recoltare;
3
- frotiuri executate din sânge recoltat pe EDTA .
Recipient de recoltare
a) se execută frotiuri de sânge capilar direct pe lame de microscopie;
b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemogramă .
3
Cantitate recoltată
a) 3-5 frotiuri;
b) 2 mL .
3
Prelucrare necesară după recoltare
Este preferabil ca fixarea frotiurilor să se facă în primele 30 minute de la recoltare. Eventual, se poate face în primele 8
ore. Amestec fixator: alcool etilic 9 părŃi + formol 40% 1 parte. Fixarea se cronometrează 30 secunde, după care
frotiurile se spală cu jet de apă de robinet. Frotiurile fixate se pot colora imediat sau se pot păstra câteva zile la
temperatura camerei, până la colorare .
3
Stabilitate probă
- frotiurile nefixate sunt stabile maxim 8 ore la 18-30ºC;
3
- frotiurile fixate sunt stabile 5 zile la temperatura camerei .
Metodă - examinare microscopică .
3
Determinarea citochimică a fosfatazei alcaline este bazată pe formarea unui precipitat colorat brun, a cărui intensitate
este subiectiv gradată de la 0 la 5:
- grad 0 = fără pigment, granulaŃii absente
- grad 1 = una-puŃine granulaŃii distincte
- grad 2 = câteva granulaŃii localizate
- grad 3 = granulaŃii difuz distribuite
- grad 4 = precipitate intense compacte care acoperă citoplasma celulelor, dând aspect de pigment continuu, nucleul
celulelor fiind însă vizibil
- grad 5 = număr maxim de granulaŃii, cu nucleul frecvent invizibil.
Scorul fosfatazei alcaline leucocitare într-un frotiu este dat de suma scorurilor de colorare a 100 granulocite neutrofile
1;3
mature .
3
Valori de referinŃă - Scor FAL:10-100.
Interpretarea rezultatelor
Valori scăzute:
- leucemie granulocitară cronică (tipic, FAL este foarte scăzută sau absentă);
- hemoglobinurie paroxistică nocturnă;
6
- sindroame mielodisplazice .
Valori crescute
- boli mieloproliferative, altele decat LGC (policitemia vera şi unele cazuri de metaplazie mieloidă cu mielofibroză);
- LGC în remisiune (poate avea FAL normal sau chiar crescut);
- infecŃii;
- afecŃiuni inflamatorii;
- leucemie cu celule păroase .
1,6

Limite şi interferenŃe
• CondiŃii fiziologice de stress: sarcină, efort fizic intens (cresc indicele FAL).
• CondiŃii patologice: infecŃiile asociate LGC pot creşte valoarea FAL.