Page 129 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

Pregătire pacient - nu este necesară o pregătire prealabilă; sunt utile informaŃii asupra unor tratamente perfuzabile cu
soluŃii macromoleculare efectuate premergător determinării, transfuzii în ultimele 120 zile, boli infecŃioase cu germeni
3
Gram negativi cu/fără septicemie, boli maligne (carcinom, limfom, mielom) .
3
Specimen recoltat - a) sânge capilar din pulpa degetului; b) sânge venos .
3
Recipient de recoltare - b) vacutainer fără aditivi sau gel activator (capac roşu sau incolor) .
3
Cantitate recoltată - b) cât permite vacuumul .
3
Cauze de respingere a probei - specimen puternic hemolizat .
Stabilitate probă - testul se efectuează imediat, dacă acest lucru nu este posibil, proba se păstrează 48 ore la 2 -
8°C .
3
Prelucrare necesară după recoltare - după coagularea completă la temperatura camerei se îndepărtează serul şi
1;3
cheagul. Din hematiile rămase se prepară o suspensie 10% în plasma proprie sau în ser fiziologic .
Metodă de determinare - hemaglutinare pe placă . Se utilizează doi martori: martor AB (hematiile pacientului cu ser
3
1
AB) şi martor auto (hematiile şi serul propriu) .
NOTĂ: în laboratoarele Synevo se efectuează metoda directă/globulară (Beth-Vincent) de determinare a grupului
sanguin ABO utilizând seruri anti-A, anti-B şi anti-AB.
Limite şi interferenŃe
Rezultatul determinării grupului de sânge trebuie citit de două persoane şi trebuie eventual confirmat pe o a doua
probă de sânge .
1;2
Erori de citire datorate greşelilor de tehnică:
- sticlărie murdară; contaminare bacteriană;
- prezenŃa de microcheaguri (falsă aglutinare);
- nu se respectă: proporŃiile hematii/ser, ordinea de picurare a serurilor hemotest (aglutinări contradictorii), timpul de
citire – citire tardivă: margini uscate (falsă aglutinare), citire precoce (lipsa aglutinării sau aglutinare slabă).
Erori datorate hematiilor
False aglutinări
a) PrezenŃa rulourilor (pseudoaglutinarea): utilizarea de soluŃii macromoleculare (Dextran, HES), tulburări de
coagulare, probe de sânge incomplet coagulate, hiperfibrinogenemia, produşi de degradare a fibrinei, agenŃi
fibrinolitici, disproteinemia, paraproteinemia, crioglobulinemia, creşterea reactanŃilor de fază acută, medicamente (doze
mari de heparină, sulfat de protamină), factori reumatoizi, creşterea colesterolului, bilirubinei, leucocitoza, enzime
leucocitare . Martorul AB este pozitiv; spălarea hematiilor permite efectuarea corectă a probei globulare .
2
1
b) Autoaglutinarea
• PrezenŃa de aglutinine la rece (martorul auto este pozitiv). Proba de sânge şi reactivii se preincubează la 37ºC, iar
2
testarea se efectuează la cald .
• Hematii acoperite de aloanticorpi: nou-născut din sarcină incompatibilă (în sistemul Rh, ABO),
pacient transfuzat cu sânge incompatibil.
• Determinarea grupului sanguin pe sânge recoltat din cordonul ombilical: gelatina Wharton, substanŃă
macromoleculară care înconjoară eritrocitele, dă aspect de pseudoaglutinate. Pentru îndepărtarea ei este necesară
spălarea hematiilor de cel puŃin 6 ori înaintea determinării .
1
• PrezenŃa complexelor imune medicamentoase.
c) Poliaglutinarea
În septicemiile cu bacilli Gram negativi sunt expuse criptoantigene (T), prin acŃiunea enzimatică a agenŃilor bacteireni,
1
recunoscute de anticorpi (anti-T) prezenŃi în majoritatea serurilor umane . Martorul AB este pozitiv .
2
Aglutinări absente sau slabe sau aspect de dublă populaŃie: aglutinarea nu este totală, cu prezenŃa de hematii libere
(aglutinatele apar pe un fond roz) :
1;2
• sânge vechi;
• antigene slabe: nou-născuŃi, prematuri;
• subgrupe A sau B slabe;
• atenuarea antigelor (în leucemii, limfoame, boală Hodgkin);
• pacient cu grup A sau B transfuzat cu sânge grup O, hemoragie materno-fetală;
• prezenŃa în cantitate mare de substanŃă A sau B în plasmă (cancer de stomac, pancreas) care neutralizează
anticorpii test (hematiile trebuie spălate pentru îndepărtarea acestora);
• prezenŃa unei chimere sau mozaic (excepŃional, ex.: post-alotransplant medular).