Page 131 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

7.3.3 Test Coombs direct

Sinonime – test antiglobulinic direct.

InformaŃii generale
Demonstrarea prezenŃei de imunoglobuline sau a complementului pe suprafaŃa hematiilor susŃine diagnosticul de
6
distrucŃie eritrocitară mediată imun .
Există două clase majore de anticorpi care reacŃionează cu eritrocitele. Anticorpii compleŃi sau salini aglutinează
eritrocitele suspendate în soluŃie salină; aceştia sunt de obicei de tip IgM (cel mai bun exemplu de aglutinare salină la
temperatura camerei este cea utilizată în grupajul ABO). In vivo anticorpii IgM fixează complementul şi produc
hemoliza imediată intravasculară. Anticorpii care nu reacŃionează vizibil în mediu salin şi produc reacŃii de aglutinare
numai prin utilizarea de tehnici speciale sunt numiŃi aglutinine incomplete şi sunt de obicei de tip IgG (cel mai bun
exemplu sunt anticorpii anti-Rh, care, dacă sunt prezenŃi în serul primitorului de sânge incompatibil, produc o reacŃie
3
hemolitică transfuzională întârziată, extravasculară) .
Pentru a certifica faptul că hematiile unui pacient sunt învelite (sensibilizate) cu imunoglobuline, complement sau
ambele, se adaugă la o suspensie de eritrocite provenite de la pacient antiser cu reactivitate faŃă de moleculele de Ig
şi/sau complement umane, care va determina aglutinarea acestora. IniŃial testarea se face cu antiseruri polispecifice,
care conŃin anti-IgG, anti-C3d şi ocazional şi activitate anti-lanŃ uşor. Reactivii monospecifici diferenŃiază în continuare
între IgG, C3d, existând şi seruri monospecifice pentru C3b, C4b, C4d şi lanŃul greu al IgG. Antiseruri specifice pentru
IgM sau IgA sunt rar utilizate, deoarece IgM nu mai sunt găsite de obicei încă ataşate pe suprafaŃa celulară, iar IgA
6
sunt foarte rar întâlnite pe suprafaŃa eritrocitelor .
Utilizând sânge recoltat pe EDTA sau pe citrat activarea in vitro a complementului de către autoanticorpii la rece
benigni este inhibată. Spălarea eritrocitelor îndepărtează globulinele solubile sau ataşate nespecific, ceea ce permite
4
detecŃia imunoglobulinelor şi factorilor complementului specific legate de eritrocite in vivo .
Recomandări pentru efectuarea testului Coombs direct
• investigarea reacŃiilor transfuzionale acute sau întârziate (demonstrarea fixării pe suprafaŃa eritrocitelor de la donator
a aloanticorpilor prezenŃi în serul pacientului);
• suspiciune de hemoliză autoimună;
• boala hemolitică a nou-născutului;
• hemoliză imună indusă de medicamente;
• atunci când martorul auto efectuat în cadrul grupajului sanguin, screening-ului prezenŃei de aloanticorpi şi testelor de
4
compatibilitate este pozitiv .
Pregătire pacient - nu este necesară o pregătire prealabilă .
5
5
Specimen recoltat - sânge venos .
5
Recipient de recoltare - vacutainer cu K3-EDTA .
5
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
Cauze de respingere a probei - specimen coagulat .
5
Stabilitate probă - testul se efectuează imediat, dacă acest lucru nu este posibil, proba se păstrează 48 ore la 2-8°C .
5
Prelucrare necesară după recoltare - o parte din eritrocite se spală de trei-patru ori cu soluŃie salină normală, urmată
1;5
de prepararea unei suspensii eritrocitare în ser fiziologic steril 5% .
Metodă de determinare – hemaglutinare pe lamă .
5
NOTĂ: în laboratoarele Synevo se efectuează testul Coombs cu antiglobulină umană polispecifică.
Valori de referinŃă – negativ.
Interpretarea rezultatelor
Test Coombs direct pozitiv se asociază cu următoarele entităŃi 2;3;4;6 :

AfecŃiune Tipul Ac Specificitatea TCD
Boala aglutininelor la rece primară (idiopatică) AutoAc tip IgM, de obicei C3 (IgM disociază de pe
sau secundară (asociată cu macroglobulinemie monoclonali (rar IgG sau IgA), cu eritrocite şi nu sunt
Waldenström şi alte boli limfoproliferative, specificitate anti-I/i, rar Pr detectabile)
mononucleoză infecŃioasă, infecŃii cu
Mycoplasma pneumoniae etc.)
Hemoglobinuria paroxistică la rece AutoAc tip IgG policlonali, cu C3 (IgG disociază de pe
acută/tranzitorie (asociată cu boli infecŃioase) şi specificitate anti-P (Ac Donath- eritrocite la cald)
cronică, idiopatică sau asociată cu sifilisul tardiv Landsteiner)
sau congenital