Page 212 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1
P. 212

8.1.30 Electroforeza lipoproteinelor

                  InformaŃii generale
                  Lipoproteinele conŃin lipide hidrofobe legate de proteine, alcătuind împreună un complex hidrosolubil. Sunt împărŃite în
                  patru clase principale în funcŃie de mărime (după greutatea moleculară), densitate (separare prin ultracentrifugare şi
                  flotaŃie) şi încărcatură electrică (separare prin electroforeză).
                  Clasele de lipoproteine sunt următoarele:
                      ·    Chilomicronii: diametru 5000Å, densitate între 0,940-0,980; se depun în zona γ a lipoproteinelor; constituiŃi în
                          proporŃie de 90% din trigliceride; cresc mult postprandial, fiind generaŃi ca urmare a ingestiei şi absobŃiei
                          intestinale a lipidelor alimentare; dau opalescenŃă serului; reprezintă 0-2% din cantitatea de lipoproteine.
                      ·    β-Lipoproteine  sau  LDL  (Low  Density  Lipoproteins):  densitate  între  1,019-1,063;  migrează  în  zona  β-
                          globulinelor; transportă lipoproteinele de densitate joasă spre Ńesuturi periferice şi în particular spre peretele
                          arterial; sunt bogate în colesterol (45%), iar creşterea acestora este asociată cu riscul cardiac – “colesterol
                          nociv”; reprezintă  aproximativ 33-70% din totalul lipoproteinelor.
                      ·    Preβ-Lipoproteinele sau VLDL (Very Low Density Lipoproteins): densitate între 0,95-1,006; sunt mai mobile
                          decât lipoproteinele β, migrează la nivelul α2-globulinelor, transportă trigliceride, fosfolipide, colesterol (15%);
                          sintetizate în ficat fiind denumite şi chilomicroni endogeni; reprezintă aproximativ 7-24% din lipoproteine.
                      ·    α-Lipoproteine  sau  HDL  (High  Density  Lipoproteins):  densitate  între  1,063-1,210;  transportă  proteine,
                          fosfolipide,  colesterol  (18%,  în  special  esterificat);  asigură  întoarcerea  la  ficat  (pentru  a  fi  metabolizat)  a
                          colesterolului din Ńesuturi, şi mai ales din peretele vascular -”colesterol protector”; indicator pentru estimarea
                          riscului cardiovascular; reprezintă aproximativ 10-30% din totalul lipoproteinelor.
                  Pe lângă aceste 4 tipuri principale  mai sunt descrise următoarele lipoproteine:
                      ·    Preα-Lipoproteine: densitate > 1,210; migrează la nivelul albuminei; conŃin acizi graşi liberi, iar cantitatea lor
                          aproximativă este de 8-13%.
                      ·    O fracŃiune suplimentară între α şi pre β (între VLDL şi HDL) reprezentată de lipoproteina A-Lp(a) a cărei
                          mobilitate  variază  în  funcŃie  de  fenotip;  formată  din  fosfolipide,  colesterol  şi  apoproteina    B100,
                          asemănătoare cu molecula plasminogenului; introduce LDL în celule în absenŃa receptorilor; reprezintă un
                          factor de risc independent pentru procesul de ateroscleroză;  cantitate normală: <30 mg/dl.
                      ·    Lipoproteine cu densitate intermediară IDL (Intermediar Density Lipoproteins): densitate între 1,004-1,010; se
                          formează  în plasma circulantă ca urmare a eliberării enzimatice a trigliceridelor din chilomicroni şi VLDL;
                          cresc mult postprandial şi apar în serul bolnavilor cu dislipidemie tip III (“Broad Beta Disease” – BBD).
                  Cazuri particulare :
                  -   FracŃiunea preβ crescută poate masca Lp(a); de aceea, se lasă serul 24-48h la temperatura ambiantă după care
                      se reîncepe analiza.
                  -   Lipoproteina X: înlocuirea chilomicronilor cu o formă patologică de lipoproteină ce migrează la catod; structură
                      asemănătoare LDL (conŃine trigliceride şi colesterol liber în cantitate crescută); apare în colestază şi în absenŃa
                      congenitală a enzimei LCAT (lecitin-colesterol-aciltransferază) 1;2;3;5 .
                  Recomandări pentru efectuarea electroforezei lipoproteinelor - suspiciune de tezaurismoze lipidice şi identificarea
                  dislipidemiilor  familiale;  arc  cornean  precoce  (pacienŃi  sub  40 ani); pacienŃi cu xantelasme şi xantoame;  valoare a
                  trigliceridelor > 300 mg /dl; ser lipemic à jeun; complicaŃii cardiovasculare (afecŃiuni coronariene şi istoric familial de
                  boală coronariană prematură, arterită a membrelor inferioare, accidente vasculare cerebrale, insuficienŃă circulatorie în
                  teritoriul  vertebro-bazilar,  HTA);  afecŃiuni  metabolice  (diabet  zaharat,  obezitate,  hiperuricemie,  hipotiroidism);  alte
                  afecŃiuni: sindrom nefrotic, alcoolism cronic; administrare de contraceptive orale .
                                                                           2;3
                  Pregătire pacient - pacientul trebuie să respecte o dietă constantă timp de 2-3 săptămâni; înainte de recoltare va
                              5;6
                  ajuna 12-14 ore .
                  Specimen recoltat - sânge venos .
                                           6
                                                                        6
                  Recipient de recoltare - vacutainer fără anticoagulant cu/fără gel separator .
                  Prelucrare necesară dupa recoltare - se separă serul prin centrifugare; se efectuează electroforeza imediat; dacă
                  acest lucru nu este posibil, serul se păstrează la 2-8°C.
                                        6
                  NOTA: serul nu se congeleaza .
                                                       6
                  Stabilitate probă - serul este stabil 72 ore la 2-8°C .
                                                                             6
                  Metodă - electroforetică, urmată de scanarea densitometrică a fracŃiunilor obŃinute .
                  Valori de referinŃă:
                  - chilomicroni: 0-2%;
   207   208   209   210   211   212   213   214   215   216   217