Page 530 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

Bacteriile captate în flaconul de hemocultură pot fi:
· intacte, libere în plasmă, în faza de multiplicare activă şi vor continua să se dividă rapid în bulionul de
hemocultură, sau în faza de repaus şi vor începe să se multiplice la sfârşitul fazei de latenŃă
corespunzătoare adaptării la mediul nutritiv al flaconului;
· mai mult sau mai puŃin lezate sau mascate de acŃiunea sistemului anticorp-complement, antibiotice,
fagocitate de polinucleare sau monocite şi se vor dezvolta după autoliza leucocitelor dacă rămân viabile;
· bacterii în forme L (deficiente nutriŃional) a căror creştere necesită un mediu adaptat (hipertonic şi bogat
7
în factori de creştere ) .
Creşterea bacteriilor în hemocultură poate fi întârziată sau împiedicată dacă nu se utilizează un anticoagulant în mediul
de cultură, deoarece microorganismele riscă să fie capturate în cheagul de fibrină. În acelaşi timp, unele
anticoagulante pot fi toxice faŃă de anumiŃi agenŃi patogeni la fel ca antibioticele prezente în sânge. Aceste obstacole
pot fi înlăturate dacă se utilizează polyanetholsulfonat de sodiu (SPS), un anticoagulant netoxic care favorizează
proliferarea bacteriană prin neutralizarea activităŃii bactericide a serului uman şi inhibarea acŃiunii unor antibiotice
(Streptomicină, Kanamicină, Gentamicină, Polymixină B). SPS-ul poate avea rol inhibitor asupra unor suşe de
Peptostreptococcus, Neisseria, efect neutralizat de prezenŃa gelatinei în mediul de cultură.
Sunt comercializate sisteme semiautomate sau automate computerizate pentru detecŃia rapidă a bacteriilor în
hemoculturi. Principiile pe care se bazează aceste sisteme sunt multiple. Le menŃionăm doar pe cele pe care le
utilizăm in cadrul laboratorului Synevo: detecŃia directă a producerii CO2, prin:
- scanarea seriată a eşantioanelor de gaz rezultat în urma creşterii bacteriene în flaconul de hemocultură, ca în
sistemul BACTEC (Becton Dickinson Instruments Systems);
- forŃarea fluidului de cultură (sub presiunea CO2 degajat) să treacă într-un compartiment semnal de unde poate fi
examinat microscopic şi subcultivat, ca în OXOID SIGNAL SYSTEM .
5
Recomandări pentru determinare
Se face la indicaŃia medicului în anumite situaŃii clinice cum sunt:
• toate cazurile cu febră de origine neprecizată, mai ales dacă se acompaniază de semne clinice evocatoare de
infecŃie;
• sepsis, şoc septic;
• pacienŃi cu endocardită acută;
• sindrom sugestiv pentru infecŃie sistemică cu germeni specifici (febră enterică, bruceloză, leptospiroză);
• infecŃii localizate severe (meningite, pneumonii, supuraŃii intraabdominale).
Hemocultura este în plus motivată la:
• bolnavii imunodeprimaŃi (cancer, toxicomani);
• pacientul care este supus unei agresiuni medicale (cateter, dializă sau intervenŃii chirurgicale) şi prezintă o stare
febrilă;
• în anumite situaŃii particulare (femeie însărcinată, pacient cardiac, diabetic, cu insuficienŃă renală, insuficienŃă
hepatică) când pacientul prezintă febră de origine neprecizată .
4
Pregătirea pacientului
Prelevarea se efectuează înainte de tratament antimicrobian, conform evoluŃiei predictive a curbei febrile sau în
momentul în care bolnavul semnalează apariŃia frisonului. În cazul în care acest lucru nu este posibil, sângele va fi
prelevat imediat înaintea administrării unei noi doze de antibiotic. Se indică prelevarea a trei probe intermitente în
3
decurs de 24 de ore; în urgenŃe ritmul este la un interval de 30-60 de minute .
Specimen recoltat - sânge venos, de preferinŃă à jeun (pe nemâncate), hiperlipemia putând împiedica evidenŃierea
unei creşteri bacteriene în mediul lichid.
Zona de elecŃie pentru puncŃie este reprezentată de venele plicii cotului. Procedura de prelevare respectă normele de
asepsie şi antisepsie necesare pentru a evita contaminarea probei cu bacterii rezidente în flora tegumentară. După
recoltarea sângelui, proba de 10 mL sânge, recoltată în seringă se introduce în recipientul cu mediul de cultură Signal
prin înŃeparea capacului de cauciuc al acestuia în condiŃii de strictă asepsie. Flaconul se agită blând pentru
omogenizarea acestuia în masa mediului. Proba se etichetează şi se transportă în cel mai scurt timp de la recoltare la
4
laborator, la temperaturi cât mai apropiate de 37ºC (cutie izotermă) .
4
Materiale necesare - seringă sterilă de 10 mL; recipient cu mediu de cultură Signal .
4
Cantitate recoltată - adult:10 mL; copil:3-5 mL .
Cauze de respingere a probei
• probe neetichetate;
• probe incorect recoltate (nu s-au respectat regulile de antisepsie);
4
• transport necorespunzător .