Page 531 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

Prelucrare necesară după recoltare - se ataşează camera de expansiune livrată în acelaşi kit. Se incubează la 37ºC.
Durata incubării la termostat şi urmărirea probei este în medie de 7 zile. Se impune incubare mai prelungită la pacienŃii
cu endocardită subacută, la probele prelevate sub antibioticoterapie (până la 14 zile) sau când urmărim
4
microorganisme exigente .
Metodă de lucru
Pentru hemocultură se utilizează kit-ul Signal-Oxoid, compus din:
a) recipient cu mediu Signal; compoziŃia acestui mediu permite creşterea germenilor aerobi, anaerobi şi microaerofili,
ceea ce provoacă o creştere a presiunii detectată prin indicatorul de creştere adaptat flaconului (camera de
expansiune);
b) camera de expansiune pentru mediu, în care în cazul multiplicării bacteriene şi creşterii presiunii, o parte din
4
amestecul sânge/bulion trece în ea şi indică activitate bacteriană (hemocultura pozitivă) .
Pentru urmărirea probelor se foloseşte metoda clasică:
Examenul macroscopic al flaconului:
• Se examinează macroscopic - vizual de două ori pe zi flacoanele pentru a căuta semnele creşterii bacteriene. Este
posibil ca aspectul flaconului să orienteze asupra bacteriei în cauză, de ex:
a) turbiditate - bacili Gram negativi aerobi, Staphylococcus, Bacteroides;
b) hemoliză - Streptococcus, Staphylococcus, Lysteria, Clostridium, Bacillus;
c) producere de gaz - bacili Gram negativi aerobi şi anaerobi;
d) coaguli - Staphylococcus aureus.
Examinare microscopică: preparat proaspăt, frotiu colorat Gram
• Ameliorarea creşterii bacteriene. Constanta agitare a recipientelor în primele 24h de incubare îmbunătăŃeşte
5;9
creşterea marii majorităŃi a bacteriilor aerobe .
Interpretarea rezultatelor
AbsenŃa creşterii - mediul din recipientul Signal rămâne limpede şi nu trece de manşonul verde al camerei de
expansiune. În primele 6-12 ore de incubare se pot face subculturi oarbe (inocularea pe geloza chocolat în atmosfera
de CO2 la 35ºC pentru alte 48h sau în bulion thyoglicolat cu resazurină) şi frotiuri care se vor colora Gram (examinare
microscopică).
Recipientele cu creştere absentă vor fi reincubate şi urmărite în continuare.
Hemocultura pozitivă - dacă în sângele de cercetat au existat germeni care s-au multiplicat în mediul de cultură
(hemocultură pozitivă), mediul va trece în camera de expansiune şi se va ridica deasupra manşonului verde al
acesteia.
Se prelevează din zona inferioară a camerei de expansiune o cantitate mică de mediu. Accesul în camera de
expansiune se face prin partea ei superioară prin manevră sterilă. Această manevră nu poate contamina conŃinutul
recipientului Signal.
Mediul prelevat se foloseşte pentru:
a) întindere de frotiuri pe lame de microscopie; acestea se examinează după colorare Gram. În raport cu
rezultatul citirilor se fac repicări.
b) repicări pe medii solide şi lichide: geloză-sânge/Columbia-sânge, agar-chocolat, Levine, Sabouraud cu
Cloramfenicol, bulion thioglycolat cu resazurină.
c) Aceste plăci se incubează la 37ºC-35ºC în aerobioză şi în atmosferă cu 5-7% CO2 pentru 48-72 de ore. Se
examinează coloniile izolate.
d) teste necesare pentru identificare: ID catalaza, trusa de identificare Stafilococ, trusa de identificare
Streptococ, discuri de Optochin, factori X, V şi XV, medii politrope pentru enterobacterii, reacŃia oxidazei,
identificarea levurilor prin testul Candifast.
e) testarea sensibilităŃii la antibiotice sau antifungice.
Eliberarea rezultatelor
a) rezultat parŃial prin frotiu colorat Gram
b) rezultat definitiv după izolarea, identificarea bacteriei şi efectuarea antibiogramei sau antifungigramei.
Interpretarea rezultatului final se face în funcŃie de contextul clinic şi de numărul flacoanelor pozitive în raport cu cele
5
recoltate .
Hemoculturi pozitive
Se iau în considerare:
• mai multe hemoculturi pozitive cu un germen patogen;
• mai multe hemoculturi pozitive cu un germen obişnuit comensal într-un anumit context clinic;
• 1 hemocultură pozitivă cu germeni patogeni cunoscuŃi (Salmonella);