Page 54 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1
P. 54

unde  are  loc  formarea  precipitatului.  Atingerea  punctului  de  echivalenŃă  formează  o  linie  dreaptă  între  cele  două
                  godeuri. Dacă nu se cunoaşte concentraŃia unuia dintre reactivi, unul sau ambii reactivi trebuie utilizaŃi în diluŃii multiple
                  pentru a asigura ca una dintre reacŃii să aibă loc în apropierea punctului de echivalenŃă. Astfel de reacŃii sunt lente (1-2
                  zile) şi necesită concentraŃii mari de reactivi, de aceea în laboratorul clinic au fost în mare măsură înlocuite cu metode
                  mai rapide.
                  Imunodifuzia radială: Ag difuzează în gel agar care conŃine Ac.
                  Imunoelectroforeza: iniŃial se efectuează separarea electroforetică a proteinelor serice în gel agar, apoi se plasează Ac
                  într-un  şănŃuleŃ  în  agar;  Ac  şi  proteinele  difuzează  unele  spre  altele  cu  formarea  de  arcuri  de  precipitare;  diferite
                  proteine pot fi identificate cu Ac specifici. Dacă Ac specifici sunt dispuşi pe întreaga suprafaŃă a gelului se va forma o
                  bandă de precipitare: imunofixare (metoda folosită în laboratorul Synevo pentru evidenŃierea benzilor monoclonale).

                  ReacŃia  de  fixare  a  complementului  (RFC):  Ag  este  incubat  o  perioadă  de  timp  cu  serul  de  testat  în  prezenŃa
                  complementului provenit de la cobai. Dacă sunt prezenŃi anticorpii specifici, aceştia vor reacŃiona cu Ag şi vor forma
                  complexe imune care vor lega complementul şi îi vor bloca funcŃia. În  absenŃa Ac specifici nu se vor forma complexe
                  imune,  iar  complementul  liber  va  induce  liza  amestecului  hemolitic  alcătuit  din  eritrocite  de  oaie  şi  hemolizină
                  monoclonală.
                  În cazul prezenŃei anticorpilor specifici rezultatele vor fi exprimate semicantitativ sub formă de titruri.
                  Înainte de testarea propriu-zisă, serul este decomplementat prin incubare 30 minute la 56ºC şi folosit în decurs de 8
                  ore;  în  cazul  în  care  testul  se  va  efectua  după  o  perioadă  mai  mare  de  timp,  serul  va  trebui  să  fie  din  nou
                  decomplementat prin incubare 10 minute la 56ºC.
                  În laboratorul Synevo, RFC se efectuează pe un analizor automat şi se aplică la următoarele teste: serologie Borrelia,
                  Coxiella burnetii şi Listeria monocytogenes. Reactivii liofilizaŃi sunt incluşi în godeuri plasate într-un strip, care după
                                                                                        1
                  pipetarea serului va fi introdus în analizor. La fiecare rulare a probelor este folosit un ser de control .


                                                         Bibliografie

                  1.   Laborator Synevo. ReferinŃe specifice tehnologiei de lucru utilizate.  2006. Ref Type: Catalog.
   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59