Page 100 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

5 METODE DE LUCRU GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

aceştia se vor lega de antigenele corespunzătoare de pe strip; după o etapă de spălare, strip-ul este
incubat cu un conjugat anti-IgG uman marcat cu peroxidază; conjugatul se va ataşa la porţiunea IgG
a complexului antigen-anticorp; după îndepărtarea prin spălare a conjugatului nelegat se adaugă
soluţia de colorare – un sistem de detecţie enzimatică colorimetrică care conţine peroxid de hidrogen
şi 4-cloro-1-naftol; dacă este prezent conjugatul legat reacţia enzimatică va genera un produs colorat
albastru-închis la nivelul benzilor ocupate de anticorpi specifici; astfel, benzile vizualizate la nivelul
strip-ului sunt rezultatul legării anticorpilor specifici de antigenele individuale recombinate de la nivelul
strip-ului.

Proteinele transferate pe Electroforeza în gel de
membrana de poliacrilamidă în prezenĠa
nitroceluloză SDS

Adăugarea
conjugatului
anti-IgG uman Vizualizarea
marcat benzii specifice

Fig. 5.4.1 Etapele reacţiei Western blot
(Adaptare după www. smkdds.com)
Bibliografie

1. Laborator Synevo. Referinţe specifice tehnologiei de lucru utilizate. 2010. Ref Type: Catalog.
2. Lothar Thomas. Immunochemical technics. In Clinical Laboratory Diagnostics-Use and
Assessment of Clinical Laboratory Results. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt /
Main, Germany, 1 Ed., 1998, 1432-1433; 1437-1441.

100