Page 104 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

5 METODE DE LUCRU GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

(vezi fig. 5.5.1).
Deşi bandarea G standard este adecvată în majoritatea situaţiilor, mai pot fi obţinute
informaţii suplimentare privind structura cromozomului şi prin alte tehnici de colorare 1;2;3 .
Bandarea Q a fost prima metodă de colorare cromozomială, reactivul fiind reprezentat de
quinacrină, un colorant fluorescent. Deoarece fluorescenţa este tranzitorie, metoda a fost
înlocuită cu bandarea G care asigură o colorare permanentă a preparatului. A rămas o
singură aplicaţie curentă a bandării Q şi anume, identificarea rapidă a cromozomului Y, la
pacienţii care prezintă ambiguitate sexuală.
Bandarea C este folosită pentru colorarea centromerelor, stabilind astfel dacă un cromozom
prezintă 2 centromere (dicentric).
Bandarea T este folosită pentru marcarea telomerelor cromozomiale.
Bandarea R (reverse banding) conferă un aspect similar celui obţinut prin bandarea
G numai că benzile luminoase şi întunecate sunt inversate; este utilă în special pentru
identificarea deleţiilor telomerice, deoarece în această coloraţie telomerii apar ca benzi
întunecate . 2
Nitratul de argint este utilizat în analiza cariotipului pentru identificarea regiunii cromozomiale
în jurul căreia se formează nucleolul (NOR = Nucleolus Organizer Region); la om, NOR
conţine genele pentru ARN-ul ribozomal grupate pe braţul scurt al cromozomilor acrocentrici
(perechile 13,14,15, 21 şi 22).

Fig. 5.5.1 Ideograma corespunzătoare cromozomului 1
(Adaptare după General Cytogenetics Information htttp://home.comcast.net)

5. După colorare lamele sunt acoperite cu o lamelă şi examinate la microscop; sunt localizate
metafazele considerate ca fiind adecvate şi sunt examinate cu un obiectiv de putere mare ce
asigură o mărire totală a imaginii de ~ 1250x. În cursul analizei directe se consemnează atât
numărul cromozomilor cât şi prezenţa sau absenţa unui cromozom şi/sau a unor segmente
recunoscute ale cromozomilor.

104