Page 139 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1
P. 139
GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 5
AL LABORATOARELOR SYNEVO METODE DE LUCRU
Coloraţia Ziehl-Neelsen este folosită pentru identificarea următoarelor grupe de bacterii:
Mycobacterium, Nocardia, Rhodococcus, Tsukamurella şi oochiştii de Cryptosporidium, Isopora,
Sarcocystis şi Cyclospora .
5
Uzual în bacteriologie coloraţia Z.N. este folosită pentru decelarea Mycobacteriilor. Acestea, spre
deosebire de alte bacterii, datorită prezenţei în peretele bacterian a unor substanţe ceroase, se
colorează la cald cu fucsina bazică şi rezistă la decolorarea cu acizi minerali diluaţi şi cu alcool. Bacilii
acido-alcoolo-rezistenţi apar coloraţi în roşu, iar bacteriile neacido-rezistente apar colorate în albastru
la fel ca leucocitele şi celulele tisulare, a căror citoplasmă se colorează în albastru deschis cu nucleul
albastru închis .
2
În timp s-au dezvoltat numeroase modificări de la metoda originală descrisă de Ziehl în 1882 şi
Neelsen în 1883, cea mai utilizată fiind cea descrisă de Kinyoun .
6
• Coloraţii speciale pentru structuri particulare ale unor bacterii (capsula - tuş India; granulaţii
metacromatice - Del Vecchio, spori - verde malachit).
Controlul intern de calitate al frotiurilor este obligatoriu şi se face cu martor pozitiv şi negativ .
3
În cazul coloraţiei Gram folosim următorii martori:
- martor pozitiv: Staphylococcus aureus ATCC 25923;
- martor negativ: Escherichia coli ATCC 25922
Cultura
Bacteriile aparţinând unor specii diferite pot avea caractere microscopice asemănătoare, de aceea
identificarea lor presupune şi studiul caracterelor fiziologice care sunt cercetate “in vitro” pe medii de
cultură .
2
Cultura bacteriană reprezintă rezultatul creşterii şi multiplicării bacteriilor într-un mediu nutritiv şi are
ca scop:
• izolarea microorganismelor patogene din prelevatele patologice;
• identificarea agenţilor patogeni;
• testarea sensibilităţii la antibiotice în vederea iniţierii şi monitorizării terapiei antimicrobiene .
5
Clasificarea mediilor de cultură - poate fi în funcţie de:
3;5
• medii uzuale, care permit creşterea unui număr mare de specii
bacteriene;
Tolerabilitate
• medii speciale, care permit creşterea unei game restrânse de specii,
uneori chiar ţintit pentru o singură specie.
• medii de îmbogăţire (întotdeauna lichide) pentru anumite grupe de
bacterii;
• medii de izolare: uzuale, nediferenţiale, diferenţiale, care diferenţiază
Scopul utilizării
printr-un singur caracter grupe taxonomice sau tulpini;
• medii selective, care inhibă unele grupe bacteriene favorizând
multiplicarea altora.
• medii test - convenţionale sau microtest;
Identificare
• medii multitest - asociate sau combinate.
139