Page 87 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 5
AL LABORATOARELOR SYNEVO METODE DE LUCRU

Nefelometria de rată reprezintă măsurarea kinetică a formării agregatelor. Timpul în care panta curbei
“lumină dispersată – timp” este maximă, este proporţional cu concentraţia de antigen.
Aplicaţii ale turbidimetriei şi nefelometriei: determinarea albuminemiei şi microalbuminuriei, a
imunoglobulinelor IgA, IgG, IgM, a fracţiunilor complementului C3c, C4, etc .
1;2
ISE (Ion Selective Electrodes – electrozi ioni-selectivi). Un ISE este un transductor (senzor) care
converteşte activitatea unui anumit ion dizolvat într-o soluţie printr-o membrană într-un potenţial
electric care poate fi măsurat de un voltmetru sau pH-metru. Membrana este ataşată la capătul
unui tub care conţine electrodul intern. Modificarea de potenţial este măsurată faţă de un electrod
de referinţă extern cu potenţial constant. Diferenţa de potenţial dintre cei doi electrozi depinde de
activitatea ionului în soluţie, care este legată de concentraţia ionului respectiv, permiţând în final
măsurarea sa analitică. Au fost realizate câteva varietăţi de ISE pentru diferiţi ioni: cu membrană de
sticlă (cu selectivitate pentru cationi monovalenţi: H , Na şi ioni metalici divalenţi: Pb ), cu membrană
+
2+
+
cristalină (cu selectivitate atât pentru cationi: Pb , Cu , cât şi anioni: Cl , F ), cu răşini schimbătoare
2+
-
-
2+
de ioni (ex.: electrod potasiu-selectiv), electrozi cu tuburi capilare de sticlă, electrozi enzimatici (ex.:
electrod glucozo-selectiv), electrozi gazo-sensibili (măsurarea gazelor dizolvate: NH , CO ). ISE
2
3
funcţionează pe principiul celulei galvanice: potenţialul celulei este echivalent cu potenţialul ISE
minus potenţialul electrodului de referinţă. Soluţii standard de concentraţii cunoscute sunt măsurate
de pH-metru/voltmetru, iar valorile obţinute sunt proiectate într-un grafic concentraţie – microvoltaj;
microvoltajul unei soluţii necunoscute este apoi localizat pe grafic şi este determinată concentraţia
corespunzătoare a soluţiei.
Determinările ISE nu sunt influenţate de interferenţe cum ar fi culoarea probei.
Surse de eroare: interferenţe ale altor ioni cu proprietăţi similare ionului de testat; diferenţe în rata
de difuzie a ionilor în funcţie de mărimea acestora (pentru compensarea acestui tip de eroare este
importantă asigurarea unui flux pozitiv al soluţiei spre electrod); încărcătura ionică totală a probei
afectează coeficientul de activitate (este utilizat un ajustant al încărcăturii ionice, această ajustare fiind
largă astfel încât variaţia între probe sa fie mică); temperatura: modificarea temperaturii probei cu un
singur °C poate duce la erori de măsurare de >4%; pH-ul.
Aplicatiile ISE în laboratoarele Synevo: ionograma serica şi urinară – sodiu, potasiu, clor .
2
Reacţii de latex-aglutinare: sunt teste serologice care se bazează pe reacţia antigen-anticorp –
microparticule de latex învelite în molecule de antigen/anticorp aglutinează în urma cuplării cu
anticorpul, respectiv antigenul corespunzător din serul de testat.
Latex-aglutinarea a fost adaptată pentru teste cantitative care utilizează turbidimetria/nefelometria,
asigurând creşterea sensibilităţii.
Aplicaţii în laboratoarele Synevo: determinarea ASLO, CRP, factor reumatoid .
2
Cromatografia reprezintă un grup de metode de laborator care se bazează pe adsorbţia selectivă,
prin care componentele unui amestec complex pot fi identificate şi/sau purificate (adsorbţia reprezintă
aderenţa moleculelor la suprafaţa unei alte substanţe). Metoda a fost utilizată iniţial de botanistul rus
Mikhail Tsvett pentru separarea de produşi intens coloraţi, de unde denumirea de cromatografie.
Cromatografia în coloană implică o fază mobilă (lichid sau gaz) care curge peste o fază staţionară
(solidă sau lichidă). În cromatografia în coloană un amestec de molecule este separat pe bază afinităţii
fiecarei molecule pentru faza mobilă sau staţionară: dacă o moleculă are o afinitate mai mare pentru

87