Page 322 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

Specimen recoltat - a) biopsie cutanată; b) lichid cefalorahidian recoltat prin puncţie lombară;c) lichid

sinovial; d) sânge venos; e) urină; f) căpuşă extrasă de la locul înţepăturii .
4
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant pentru proba de sânge venos
şi recipient steril pentru celelalte produse biologice .
4
Cantitate recoltată - a) fragment de piele; b) 2 mL; c) 2 mL; d) 3 mL; e) 10 mL .
4
Prelucrare necesară după recoltare - probele nu vor fi centrifugate .
4
Cauze de respingere a probei - cantitate insuficientă; probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea
heparinei ca anticoagulant .
4
Stabilitate probă - probele de sânge, produs din leziune, LCR, urină, lichid articular sunt stabile 48
ore la 2-4°C înainte de extracţia acizilor nucleici . 4
Metodă - Real-time PCR Light-Cycler: reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a
produsului PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise (test calitativ) .
4
Valori de referinţă
Borrelia - ADN: nedetectabil .
4
Limita de detecţie - 276 copii/ mL .
4
Interpretarea rezultatelor
Un rezultat pozitiv indică prezenţa de ADN Borrelia în proba recoltată .
6
Limite şi interferenţe
Un rezultat negativ nu exclude infecţia cu Borrelia, în timp ce un rezultat pozitiv în afara contextului
clinic, nu confirmă diagnosticul 3;6;7 .
Testul PCR trebuie folosit ca o metodă care îmbogăţeşte paleta de investigaţii în boala Lyme şi nu
poate înlocui celelalte metode. Rezultatele obţinute vor fi corelate obligatoriu cu serologia, datele
clinice şi epidemiologice ale pacienţilor .
6
Bibliografie

1. Bettina Wilske, Barbara J. B. Johnson, and Martin E. Schriefer. Borrelia In:Patrick R. Murray et
al. In Manual of Clinical Microbiology” 9 ed. , 2007 , 62: 971- 986.
th
2. Betty A. Forbes, Daniel S. Sahm, Alice S. Weissfeld. The Spirochetes. In Diagnostic
Microbiology, Twelfth Edition, 2007, 48: 533–541.
3. Koneman’s, Spirochetal infections. In Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, Sixth
Edition, 2006, 20: 1125-1150.
4. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.
5. Mayo Clinic. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog: Lyme Disease (Borrelia burgdorferi),
Molecular Detection, PCR. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Type: Internet
Communication.
6. Volker von Baehr, Christa Liebenthal, Brita Gaida, Frank- Peter Schmidt, Rudiger von Baehr,
Hans-Dieter Volk. Evaluation of the diagnostic significance of the lymphocyte proliferation test in
patients with Lyme borreliosis. In J Lab Med, 2007; 31(3).
7. P. Rocco La Sala, Michael B. Smith. Spirochete Infections. In Henry’s Clinical Diagnosis and
Management by Laboratory Methods, Twenty-First Edition, 2007, 58, 1059- 1074.

322