Page 333 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 18
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

zile la 2-8°C sau cel puţin 6 săptămâni congelată la -80°C. Probele pot fi congelate/decongelate de
maximum cinci ori fără pierderea ADN-ului VHB .
7
Metodă - Real-time PCR (TaqMan): reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a produsului
PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise.
Menţiune: procesarea probelor se face automat .
7
Factor de conversie: HBV-DNA (UI/mL) x5.82 = HBV-DNA (copii/mL).
Valori de referinţă - ADN-HBV nedetectabil; limita de detecţie a metodei în domeniul de linearitate
este de 55 UI/mL; sensibiliatatea analitica: 12 UI/mL. Un rezultat «nedetectabil» semnifică faptul că
este vorba fie de o viremie foarte scăzută (sub limita de cuantificare), fie de o viremie absentă .
7
Interpretarea rezultatelor
•Nivelul viremiei poate fi corelat cu markerii serologici, biochimici şi cu rezultatele biopsiei hepatice,
pentru a indica faza infecţiei cronice HBV :
1
Nivelul ADN-HBV Nivelul Examen
Faza infecţiei Status AgHBe
(copii/mL) ALT histologic
Normal sau
Faza de toleranţă imună AgHBe (+) Crescut (>10 ) Normal
5
inflamaţie minimă
Faza de activitate imună AgHBe(+) Crescut (>10 ) Crescut Inflamaţie cronică
5
(hepatită cronică) sau antiHBe (+)
Faza non-replicativă AgHBe (-) Normal sau
(purtător inactiv de Anti-Hbe (+) Scăzut (<10 ) Normal inflamaţie minimă
5
AgHBs)
Observaţie: Deoarece în urma unor studii prospective s-a constatat prezenţa afectării hepatice la un
grup de pacienţi cu viremie scăzută (<10 copii/mL, încadraţi în stadiul de purtător inactiv) s-a propus
5
ca la pacienţii cu hepatita cronică HBV AgHBe (-) cut-off-ul ADN-HBV pentru inflamaţia hepatică să
se reducă de la 10 copii/mL la 3x10 copii/mL. Acest nou cut-off are o sensibilitate de 93%, iar toate
5
4
persoanele cu infecţie VHB inactivă au nivelul ADN-HBV sub 3x10 copii/mL .
4
4
•Nivelurile înalte de ADN-HBV se asociază cu un risc crescut de carcinom hepatocelular .
6
•Una din ţintele tratamentului antiviral este obţinerea răspunsului virusologic definit prin scăderea
ADN-HBV sub 10 copii/mL .
5
3
Limite şi interferenţe: Acest tip de test a fost validat doar pentru plasma recoltată pe EDTA. Analiza
altor tipuri de probe poate duce la rezultate fals pozitive sau fals negative. Heparina inhibă metoda
PCR . 7
Bibliografie
1 BJ McMahon. Phases of Chronic Hepatitis B. In Semin Liv Dis 2004; 24: 17-21.
2. C. Niederau et al. Long-term follow-up of HBeAg positive patients treated with interferon alfa for
chronic hepatitis. în New England Journal of Medicine 1996; 334: 1422-1427.
3. EASL International Consensus Conference on Hepatitis B. în J Hepatol 2003; 38: 533-540.
4. E.K. Manesis et al. HBV-DNA în HbeAg-negative CHB. în Am J Gastroenterol 2003;
98 :2261- 2267.

333