Page 518 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

21 TESTE DE MICROBIOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

Prelucrare necesară după recoltare - analiza se efectuează pe materii fecale proaspăt emise în
maxim 3 ore de la recoltare (de preferat). Dacă acest lucru nu este posibil proba va fi păstrată la 2-8°C
maximum 3 zile. În vederea procesării, o anumită cantitate din proba omogenizată este tratată cu un
diluent special pentru solubilizarea toxinelor şi centrifugată pentru separarea supernatantului .
2
Stabilitate probă - după recoltare, proba trebuie transportată cât mai repede la laborator; proba este
stabilă 3 zile la 2-8° .
2
Metodă – imunocromatografică. O cantitate din proba diluată se amestecă cu soluţia conjugat 1
(conţine anticorpi monoclonali specifici faţă de Clostridium difficile toxina A şi toxina B conjugaţi cu
microparticule colorate) cât şi cu soluţia conjugat 2 (conţine anticorpi specifici anti-toxina A şi anti-toxina
B biotinilaţi). Un anumit volum din acest amestec este transferat într-o fereastră dedicată a casetei
testului; caseta conţine streptavidină imobilizată în banda testului şi anticorpi anti-imunoglobulină de
capră în banda controlului. Anticorpii specifici se vor lega de antigenul din probă şi forma complexe
antigen-anticorp de tip “sandwich”. Complexele migrează prin capilaritate, ajung în zona care conţine
banda testului, se leagă de streptavidina prezentă la nivelul fazei solide şi pot fi vizualizate sub forma
unei benzi colorate în negru, de orice intensitate, în fereastra rezultatelor. În absenţa toxinei A şi/sau
B din probă nu se va vizualiza nici o bandă. Testul este validat numai dacă se obţine o bandă colorată
în negru, de orice intensitate, în fereastra controlului .
2
Valori de referinţă
Clostridium difficile toxina A/B – Negativ.
Rezultatele sunt exprimate calitativ: pozitiv/negativ .
2
Limite şi interferenţe
Un rezultat negativ nu exclude prezenţa unei afecţiuni asociate cu C. difficile. Un rezultat fals-negativ
poate avea următoarele cauze:
- recoltare, transport sau păstrare improprie a probei;
- niveluri scăzute de toxine A/B, sub limita de detecţie a metodei;
- degradarea toxinelor .
2;4
Bibliografie

1. Craig A Gronczewski, MD, Jonathan P Katz, MD. Clostridium Difficile Colitis. eMedicine
Gastroenterology (update August 2006). Ref Type: Internet Communication.
2. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.
3. Laboratory Corporation of America.Directory of Services and Interpretive Guide. Clostridium
Difficile Toxins A and B, EIA. www.labcorp.com 2010. Ref Type: Internet Communication.
4. www.mayomedicallaboratories.com. Test Catalog. Clostridium Difficile Toxins A and B, Feces. Ref
Type: Internet Communication.

518