Page 576 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

21 TESTE DE MICROBIOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

de cultură (hemocultură pozitivă), mediul va trece în camera de expansiune şi se va ridica deasupra
manşonului verde al acesteia.
B. Pentru sistemul BACTEC principiul de lucru este următorul:
Prin activitatea metabolică microorganismele din flacon eliberează CO , iar flacoanele conţinând
2
un marker de activare care devine fluorescent în contactul cu CO detectează prezenţa acestuia.
2
Fotodetectorul aparatului măsoară nivelul de fluorescenţă şi trimite datele spre computer. Măsuratoarea
este interpretată de sistem în funcţie de parametrii de pozitivitate programaţi în prealabil. Computerul
identifică flaconul pozitiv care este semnalat auditiv şi vizual prin aprinderea unui beculeţ. Pe ecranul
de afisaj al aparatului apare poziţia grafică a flaconului detectat pozitiv.
Fiind un sistem complet automat flacoanele sunt monitorizate la fiecare 10 minute ceea ce permite
detectarea imediată a flacoanelor pozitive .
Protocolul de monitorizare este de 7 zile - dar dezvoltarea microorganismelor poate fi detectată după
8 ore 2;4;10;14 .
C. Hemoculturile pozitive se prelucrează astfel:
Sistemul Signal: Se prelevează din zona inferioară a camerei de expansiune o cantitate mică de
mediu. Accesul în camera de expansiune se face prin partea superioară a acesteia, printr-o manevră
sterilă. Această manevră nu poate contamina conţinutul recipientului Signal.
Sistemul BACTEC: printr-un ac ataşat flaconului se prelevează o cantitate de mediu din care se
execută frotiuri şi se însămânţează pe mediile de cultură .
2
Mediul prelevat se foloseşte pentru:
a) întindere de frotiuri pe lame de microscopie; acestea se examinează după colorare Gram.
În raport cu rezultatul citirilor se fac repicări.
b) repicări pe medii solide şi lichide în funcţie de bacteria evidenţiată microscopic: geloză-
sânge/Columbia-sânge, agar-chocolat, Levine/MacConkey, Sabouraud cu Cloramfenicol,
bulion thioglycolat cu resazurină.
c) plăcile se incubează, în funcţie de bacteria evidenţiată microscopic, la o temperatură de
35ºC-37ºC în conditii de aerobioză, în atmosferă cu 5-7% CO sau în anaerobioză (GasPack
2
+amestec reducător) pentru 48-72 de ore. Se examinează coloniile izolate.
d) teste necesare pentru identificare: ID catalaza, trusa de identificare stafilococ, trusa de
identificare streptococ, discuri de Optochin, factori X, V şi XV, medii politrope pentru
enterobacterii, reacţia oxidazei, teste API ( API 20E , API 20NE, API NH, etc) teste pentru
identificarea levurilor. Identificarea se poate face şi automat pe sistemul Vitek.
e) testarea sensibilităţii la antibiotice sau antifungice prin metoda difuzimetrică sau automată
pe Vitek .
9

D. Eliberarea rezultatelor
a) rezultat parţial prin frotiu colorat Gram – se consemnează şi se anunţă telefonic;
b) rezultat definitiv după izolarea, identificarea bacteriei şi efectuarea antibiogramei sau
antifungigramei.
Interpretarea rezultatului final se face în funcţie de contextul clinic şi de numărul flacoanelor pozitive

576