Page 573 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 21
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE MICROBIOLOGIE

Principalii factori de îmbogăţire încorporaţi în mediu care favorizează dezvoltarea germenilor sunt:
• asociere de peptone, cazeină şi gelatină pentru aportul de aminoacizi;
• extract de levuri pentru aportul de vitamine;
• hemine şi NAD care permit dezvoltarea Haemophilus şi favorizează creşterea unor germeni
pretentioşi nutritiv cum sunt Actinobacillus spp, Cardiobacterium spp, Eikenella spp şi alţi
anaerobi;
• vitamina B6, element indispensabil în dezvoltarea streptococului deficient întâlnit în
endocardite şi a stafilococului;
• CO element important pentru creşterea germenilor din speciile: Neisseria, Brucella,
2
Haemophilus, Streptococcus , Campylobacter.
Multiplicarea bacteriilor depinde însă şi de o serie de factori independenţi de condiţiile de cultivare:
densitatea germenilor în sânge, stadiul lor de multiplicare, prezenţa în sânge a unor substanţe
inhibitorii.
Bacteriemiile şi fungemiile adulţilor evoluează în general cu un număr redus de microorganisme
circulante (între 1-30 UFC/mL sânge). La nou-născut, sugar şi copilul mic concentraţia depăşeşte 100
UFC/mL. În general, între gravitatea infecţiei, prognostic şi concentraţia bacteriilor din sânge există o
relaţie direct proporţională .
3
Bacteriile captate în flaconul de hemocultură pot fi:
• intacte, libere în plasmă, în faza de multiplicare activă şi vor continua să se dividă rapid în
bulionul de hemocultură, sau în faza de repaus şi vor începe să se multiplice la sfârşitul
fazei de latenţă corespunzătoare adaptării la mediul nutritiv al flaconului;
• mai mult sau mai puţin lezate sau mascate de acţiunea sistemului anticorp-complement,
antibiotice, fagocitate de polimorfonucleare sau monocite şi se vor dezvolta după autoliza
leucocitelor dacă rămân viabile;
• bacterii în forme L (deficiente nutriţional) a căror creştere necesită un mediu adaptat
(hipertonic şi bogat în factori de creştere) .
12
Creşterea bacteriilor în hemocultură poate fi întârziată sau împiedicată dacă nu se utilizează un
anticoagulant în mediul de cultură, deoarece microorganismele riscă să fie capturate în cheagul de
fibrină. În acelaşi timp, unele anticoagulante pot fi toxice faţă de anumiţi agenţi patogeni la fel ca
antibioticele prezente în sânge. Aceste obstacole pot fi înlăturate dacă se utilizează polyanetholsulfonat
de sodiu (SPS), un anticoagulant netoxic care favorizează proliferarea bacteriană prin neutralizarea
activităţii bactericide a serului uman şi inhibarea acţiunii unor antibiotice (Streptomicină, Kanamicină,
Gentamicină, Polymixină B). SPS-ul poate avea rol inhibitor asupra unor suşe de Peptostreptococcus,
Neisseria, efect neutralizat de prezenţa gelatinei în mediul de cultură.
Sunt comercializate sisteme semiautomate sau automate computerizate pentru detecţia rapidă a bacteriilor
în hemoculturi. Principiile pe care se bazează aceste sisteme sunt multiple. Le menţionăm doar pe cele pe
care le utilizăm în cadrul laboratorului Synevo: detecţia directă a producerii CO , prin:
2
- scanarea seriată a eşantioanelor de gaz rezultat în urma creşterii bacteriene în flaconul de
hemocultură, ca în sistemul BACTEC (BACTEC 9050);
- forţarea fluidului de cultură (sub presiunea CO degajat) să treacă într-un compartiment semnal
2

573