Page 538 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

În cazul în care există suspiciune de meningită cu Cryptococcus neoformans se execută un preparat proaspăt între
1
lama şi lamelă din sediment cu tuş India . PrezenŃa de formaŃiuni rotund ovalare, capsulate (halou mare, clar şi incolor)
care pot fi înmugurite este sugestivă pentru Cryptococcus neoformans.
Pe frotiul colorat Gram se evidenŃiază prezenŃa germenilor, morfologia, tinctorialitatea, frecvenŃa şi localizarea (intra
sau extraleucocitari).
Lamele colorate May-Grunwald-Giemsa şi albastru de metilen se utilizează pentru examenul citologic. Se apreciază
procentual tipul elementelor: PMN, limfocite, notându-se în acelaşi timp aspectul lor.
Cultivarea este un mijloc de diagnostic specific, dar necesită 24 - 48 de ore şi poate fi negativă în cazul prezenŃei
germenilor neviabili sau dacă pacientul a început tratamentul antibiotic.
ÎnsămânŃarea sedimentului se efectuează pe plăci preîncălzite la termostat.
Se vor folosi: agar Columbia cu 5% sânge de berbec, agar chocolate, geloză lactozată şi bulion thioglycolat. În funcŃie
de examenul bacterioscopic, pot fi adăugate şi alte medii (Sabouraud).
Mediile sunt incubate la 37°C, eventual în atmosfera cu 5% CO2 pentru medii ca agar Columbia cu 5% sânge de
berbec şi agar chocolate.
1,3
ApariŃia culturii este urmărită zilnic timp de 3 zile pe mediile solide şi 5 zile în tubul cu bulion thioglycolat.
În cazul culturilor pozitive se continuă identificarea până la nivel de specie şi efectuarea antibiogramei.
Dacă bacterioscopia atestă prezenŃa unei mari densităŃi bacteriene în proba de LCR (zeci de bacterii pe câmp
microscopic examinat cu mărire de 1000x), se poate încerca antibiograma din cultura primară, ale cărei rezultate
3
urmează a fi confirmate prin antibiogramă pe subcultura standardizată .
Având în vedere limitele examenului microscopic şi a culturilor, s-au pus la punct metode de detectare a antigenelor
solubile în LCR: CIE, Latex-aglutinare, Coaglutinare, ELISA şi RIA.
În cadrul laboratoarelor Synevo, pentru detectarea antigenelor solubile se foloseşte ca test rapid reacŃia de latex-
aglutinare. Tehnica de lucru este conform foii de kit.
4
Un rezultat negativ nu exclude posibilitatea infecŃiei cu germenul testat deoarece antigenele bacteriene pot fi prezente
4
în concentraŃie mai mică decât limita de detecŃie a reactivilor utilizaŃi .
Un rezultat pozitiv trebuie, de asemenea, urmat de izolarea germenului, identificarea şi testarea sensibilităŃii la
antibiotice .
4
Examenul citologic, bacterioscopia şi latex-aglutinarea permit microbiologului eliberarea unui rezultat parŃial, necesar
4
clinicianului în orientarea tratamentului de primă intenŃie .

Bibliografie:

1. Betty A.Forbes, Daniel F.Sahm, and Alice S. Weissfeld. Meningitidis and other infections of the central nervous
system.In Diagnostic Microbiology, 2002, 58:907-916.
2. Buiuc T. Dumitru. Examenul lichidului cefalorahidian în diagnosticul infecŃiilor sistemului nervos central.
În Microbiologia Medicală - Ghid pentru studiul şi practica medicinei, 1992, 290-294.
3. Buiuc Dumitru, NeguŃ Marian. Examenul lichidului cefalorahidian în diagnosticul infecŃiilor sistemului nervos
central. În Tratat de microbiologie clinică, 1999, 10:186-199.
4. Laborator Synevo. ReferinŃele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2006. Ref Type: Catalog.
5. Ministerul SănătăŃii. Academia de ŞtiinŃe Medicale. Metode de laborator de uz curent. Vol. II. Bucuresti. Ed.
Medicală, 1977, 71-81.