Page 314 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

7 TESTE DE HEMATOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

în recipientul destinat probelor congelate . 1
Stabilitate probă – plasma separată este stabilă 1 lună la -20°C .
1
Metodă – test de coagulare care acţionează specific la nivelul complexului protrombinazei, prin
utilizarea unui activator de protrombină dependent de FVa izolat dintr-un venin de şarpe; sunt eliminate
astfel posibilele interferenţe exercitate de către factorii situaţi în amonte în cascada coagulării precum
şi dependenţa faţă de ionii de calciu; într-o primă etapă, plasma diluată a pacientului va fi incubată la
37°C cu un activator de factor V provenit din veninul de Daboia russeli, care converteşte FV în FVa;
coagularea va fi iniţiată în absenţa calciului prin adăugarea unui activator de protrombină dependent
de FVa izolat din veninul de Notechis scutatus; se efectuează două teste de coagulare cu şi fără
adăugarea de APC, după care se calculează raportul dintre cei doi timpi; adăugarea APC va alungi
semnificativ timpul de coagulare la persoanele cu genotip sălbatic, în timp ce pacienţii cu factor V
Leiden prezintă rezistenţă la APC, astfel că timpul lor de coagulare nu va fi influenţat semnificativ de
adăugarea acestui reactiv; reactivii conţin un inhibitor de heparină ceea ce permite efectuarea testului
la pacienţi aflaţi sub heparinoterapie, având concentraţii ale heparinei ≤2UI/mL . 2
Valori de referinţă - ≥2.5 (raport) .
2
Limite şi interferenţe
Obţinerea unui rezultat pozitiv necesită efectuarea testului genetic care depistează mutaţia factorului
V Leiden şi stabileşte statusul homozigot/heterozigot.
În unele cazuri (la valori de graniţă ale raportului) testul poate eşua în distingerea indivizilor heterozigoţi
pentru factorul V Leiden faţă de normali.
Testul nu detectează rezistenţa la proteina C activată de cauză dobândită.
Deficitul de fibrinogen, protrombină, FVIII, FX, ATIII, proteină C, proteină S (până la 100%), cât şi
excesul de fibrinogen, factor VIII, sau ATIII (de până la 5 ori normalul) nu influenţează semnificativ
valoarea raportului şi sensibilitatea testului .
2
Prezenţa anticoagulantului lupic nu exercită influenţă asupra testului. În urma unor studii efectuate
s-a constatat că de asemenea sarcina, contraceptivele orale şi anticoagulantele orale nu afectează
performanţa testului . 4
Deficitul important de factor V în plasmă (<50%) poate conduce la timpi de coagulare alungiţi şi
astfel se poate pierde performanţa discriminatorie. Prezenţa aprotininei (care inhibă APC utilizată în
test) sau a protaminei în plasma pacientului poate conduce la scăderea timpilor de coagulare şi de
asemenea la afectarea capacităţii discriminatorii. Inhibitorii direcţi ai trombinei (hirudin, argatroban)
influenţează timpii de coagulare şi valoarea raportului. Din aceste motive, trebuie întrerupt tratamentul
cu aprotinină, protamină sau inhibitori de trombină cu cel puţin 24 ore înaintea recoltării .
2
Bibliografie
1. Ian Jennings, Peter Cooper. Screening for Thrombophilia: A Laboratory Perspective. In British
Journal of Biomedical Science, 2003.
2. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog
3. Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. Activated
Protein C Resistance www.labcorp.com 2010. Ref Type: Internet Communication.
4. Reta Schöni, Peter Quehenberger, Jogin R Wu, Marianne Wilmer. Clinical evaluation of a new
functional test for detection of activated protein C resistance (Pefakit® APC-R Factor V Leiden)
at two centers in Europe and the USA. In Thrombosis Research 2007; 119(1): 17-26.

314