Page 379 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 8
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOCHIMIE

(CK), MB. www.labcorp.com . 2003. Ref Type: Internet Communication
6. Lothar Thomas Clinical Laboratory Diagnostics-Use and Assessment of Clinical Laboratory
Results, TH-Books, Frankfurt/Main, Germany 1998, 101-107.
7. Mayo Clinic, Mayo Medical Laboratories. Test Catalog. Creatine Kinase (CK) Isoenzyme
Electrophoresis, Serum. www.mayomedicallaboratories.com.Ref Type: Internet Communication.

8.1.29 Electroforeza hemoglobinei

Informaţii generale
Hemoglobina reprezintă elementul esenţial pentru principala funcţie fiziologică a eritrocitului: funcţia
respiratorie. Hemoglobina este o cromoproteină porfirinică care conţine fier, în structura sa intrând o
parte proteică - globina - şi o parte prostetică - hemul. Globina diferă ca structură de la o hemoglobină
la alta, ea imprimând specificitate diverselor hemoglobine cunoscute.
În cursul dezvoltarii organismului de la embrion la adult se succedă mai multe tipuri de Hb;
hemoglobinele embrionare Gower 1, Gower 2 şi Portland sunt înlocuite începând cu cea de-a 3-a
lună de gestaţie de către Hb fetală (HbF), care reprezintă 70-80% din totalul Hb la nou-născut, după
care sinteza sa scade rapid, ajungând la sfârşitul primului an de viaţa la valori sub 2% din totalul Hb.
Hb A şi Hb A sunt caracteristice perioadei adulte de dezvoltare; sinteza lor începe încă din perioada
2
fetală, iar după naştere ele înlocuiesc rapid Hb F. La adultul normal, Hb A reprezintă 97-98%, HbA
2-3%, iar HbF sub 1% . 2 2
Hb A este caracterizată în mod obişnuit prin mobilitatea sa electroforetică, prin afinitatea pentru O şi
prin viteza de denaturare în mediul acid şi alcalin. 2
Hb F se caracterizează prin rezistenţă crescută la denaturarea alcalină, proprietate pe care se
bazează şi determinarea ei chimică, şi prin afinitate crescută la O în raport cu Hb A. Valori crescute
2
de Hb F faţă de normal se găsesc în diverse situaţii fiziologice sau patologice: sarcină, anemii severe
diverse, anemie Biermer, leucemii, hipertiroidie, persistenţă ereditară de Hb F, β- talasemia hetero- şi
homozigotă, alte hemoglobinopatii.
Hb A poate fi uşor separată electroforetic de Hb A întrucât are o mobilitate electroforetică evident mai
2
lentă decât a Hb A .
4
Principiul metodei
Într-un câmp electric particulele încărcate cu o anumită sarcină electrică se deplasează în funcţie de
intensitatea câmpului electric, de încărcarea lor electrică, de mărimea şi forma moleculei. În cazul
hemoglobinelor anormale modificarea structurală duce la modificarea sarcinii electrice, ceea ce
permite migrarea şi separarea lor electroforetică.
Electroforeza de Hb la un pH alcalin (8.2-8.6) folosind ca suport de migrare gelul agar este o metodă
rapidă şi sensibilă, permiţând separarea Hb fiziologice şi patologice, inclusiv a fracţiilor minore . La
3
acest pH, hemoglobina prezintă o sarcină electrică negativă şi va migra către anod. La rularea fiecărui
set de probe este folosit un control ce conţine hemoglobinele A, F, S şi C. Deoarece este utilizată o
coloraţie pentru proteine şi nu una pentru hem, anhidraza carbonică (enzimă cu un conţinut crescut în
eritrocite) va fi vizualizată suplimentar în spatele benzii A2 (vezi figura 8.1.1) .
1;3
Recomandări pentru efectuarea electroforezei de hemoglobină - diagnosticul
hemoglobinopatiilor şi sindroamelor talasemice a căror suspiciune este indicată de:

379