Page 146 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

cu mastocitoză. De asemenea activarea mastocitară duce la sinteza şi secreţia de factori de creştere
şi citokine, incluzând MIP 1-α, BFGF, NGF, TNF, GM-CSF, VEGF, IL1-6, 8-10, 13,16 .
4,5
Studiile efectuate au arătat că multe aspecte ale dezvoltării mastocitelor sunt reglate în mod critic
de SCF (Stem Cell Factor), mecanismul prin care acesta promovează supravieţuirea mastocitelor
fiind inactivarea factorului de transcripţie FOXO3a şi reducerea fosforilării ţintei sale, o proteină
proapoptotică Bim .
5
Kit, receptorul pentru SCF, este o tirozin kinază tip III transmembranară, care aparţine aceleeaşi
subfamilii ca şi receptorii PDGF, Flt3 şi M-CSF. Kit este exprimat de celulele progenitoare
hematopoietice, celulele pacemaker gastrointestinale, melanocite şi celulele germinale. Kit scade de
pe suprafaţa celulelor progenitoare pe măsură ce acestea se diferenţiază, mastocitele reprezând o
excepţie de la acest fenomen, ele menţinând expresia de suprafaţă a Kit la nivele ridicate în stadiul
de celule mature . Stimularea Kit de către ligandul său, SCF, duce la dimerizarea sa şi activarea
4;5
activităţii sale tirozin kinazice intrinseci. Reziduuri specifice de tirozină se autofosforilează, ceea ce
are ca urmare activarea unor căi de semnalizare în aval, incluzând calea Ras/Erk şi calea PI3-kinazei.
Domeniul care reglează activitatea proteinei Kit este domeniul de activare A loop . Kit exercită funcţii
6
critice în biologia celulelor germinale feminine şi masculine, reglând ovogeneza, foliculogeneza şi
spermatogeneza . 4
Kit este codificat de c-Kit, localizată pe cromozomul 4 (q11-12) . Mutaţii ce duc la pierderea funcţională
4
a Kit duc la defecte în hematopoieză, melanogeneză şi gametogeneză, spre exemplu piebaldismul, o
afecţiune a pigmentării autosomal dominantă caracterizată prin prezenţa de porţiuni de piele şi păr albe.
Mutaţiile missense c-Kit pot să apară în exonul 11 (care codifică regiunea juxtamembranară), găsite
predominant in tumori stromale gastrontestinale, sau in exonul 17 (care codifică regiunea activatoare
a domeniului kinazic A loop). Un tip de mutaţie frecvent apărută în exonul 17 este la nivelul codonului
816, mutaţie găsită în câteva malignităţi umane, incluzând leucemia acută mieloidă, mastocitoză,
tumori ale celulelor germinale, limfomul sino-nazal cu celulă NK/T, teratoame intracraniale. Aceste
mutaţii în codonul 816 duc la substituţia acidului aspartic cu valina, tirozina, fenilalanina, asparagina
sau histidina .
5;7
Mutaţiile Asp816 în c-Kit (activatoare) se asociază cu activarea constitutivă a tirozin kinazei şi
promovează autofosforilarea ligand-independentă a receptorului, conferind mastocitelor activate un
avantaj de supravieţuire faţă de celulele normale. Cea mai comună mutaţie a c-Kit este substituţia
acidului aspartic cu valina, D816V, mecanismul prin care mutanta oncogenică „semnalizează” fiind
numai parţial cunoscute . Mutaţia D816V este întâlnită la >80% din pacienţii cu mastocitoză sistemică
6
şi poate reprezenta o potenţială ţintă terapeutică . 6
Heterogenitatea clinică nu poate fi explicată prin existenţa aceleeaşi mutaţii la majoritatea pacienţilor.
Astfel, cel puţin la unii pacienţi, una sau mai multe mutaţii adiţionale independente în celulele
progenitoare CD34+ sau în alte celule ar putea constitui baza moleculară responsabilă pentru fenotipul
bolii. Nu există încă dovezi că mutaţia D816V trece de la o generaţie la alta .
4
Au fost identificate şi alte mutaţii ce pot juca un rol în etiologia mastocitozei la unii pacienţi, cum
ar fi V560G (în domeniul juxtamembranar al Kit) detectată în leucemia mastocitară, D816Y, D816F,
D816H, precum şi E839K (mutaţie inactivatoare) în câteva cazuri raportate de mastocitoză la copii
şi mutaţia rară a liniei germinale F522C, căile semnalizării intracelulare responsabile de oncogeneză

146