Page 148 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

poate duce de asemenea la mastocitoză, spre exemplu prin implicarea PDGFRβ, care codifică pentru
o tirozin kinază imatinib-sensibilă.
Creşterea numărului de mastocite nu este limitată la mastocitoză, spre exemplu unii pacienţi cu
leucemie eozinofilică cronică care poartă o proteină de fuziune FIP1L1-PDGFRα prezintă de
asemenea număr crescut de mastocite şi niveluri serice crescute de triptază, manifestările clinice
putându-se suprapune cu cele ale mastocitozei sistemice cu eozinofilie. Identificarea mutaţiei c-Kit
sau a proteinei de fuziune este necesară pentru diferenţierea acestor pacienţi cu evoluţie clinică,
prognostic şi tratament diferite .
4;5
Mutaţia poate fi detectată în ADN-ul extras din biopsie cutanată, ADN din sânge periferic sau din
măduva osoasă.
Recomandări pentru mutaţia c-Kit D816V - diagnosticul mastocitozei sistemice .
3
Specimen recoltat – a) sânge venos; b) aspirat medular . 2
Recipient de recoltare – a) şi b) vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant .
2
Cantitate recoltată – a) 3-5 mL; b) 3 mL (minimum 1 mL) . 2
Cauze de respingere a probei – folosirea heparinei ca anticoagulant .
2
Stabilitate probă – 7 zile la 2-8ºC .
2
Metodă – amplificare PCR specifică a alelei mutante .
2
Interpretarea rezultatelor
Detecţia unei mutaţii la nivelul codonului 816 este inclusă ca unul din criteriile minore de diagnostic
pentru mastocitoza sistemică în clasificarea WHO a neoplaziilor hematopoietice, prezentând de
asemenea relevanţă terapeutică, întrucât imatinibul este ineficient în majoritatea cazurilor de
mastocitoză sistemică asociate cu mutaţia D816V în c-Kit 3;4;7 .
Aceste mutaţii sunt mai uşor identificate la pacienţii cu boală mai severă datorită expansiunii clonale a
celulelor derivate din progenitorii neoplazici. Astfel, prezenţa mutaţiei c-Kit în smouldering SM este un
marker de prognostic nefavorabil. De asemenea formele agresive de mastocitoză la copii se asociază
adesea cu o mutaţie identificabilă în c-Kit .
5
Limite şi interferenţe
În unele cazuri de mastocitoză sistemică mutaţia poate fi prezentă numai în mastocite. Deoarece
aceste celule rareori circulă în sânge şi sunt dificil de obţinut în număr semnificativ în specimenele de
aspirat medular, rezultate fals negative pot apărea dacă celulele neoplazice sunt prezente sub limita
de sensibilitate a testului .
2
Mutaţiile c-Kit, inclusiv D816V, pot fi de asemenea prezente la puţini pacienţi cu tumori ale celulelor
germinale sau alte tumori nonmastocitare cu sau fără mastocitoză sistemică coexistentă .
5

Bibliografie

1. Hirokatsu Yanagihori, Noritaka Oyama, Koichiro Nakamura, Fumio Kaneko. C-kit Mutations in
Patients with Childhood-Onset Mastocytosis and Genotype-Phenotype Correlation. In J Mol
Diagn. 2005 May; 7(2): 252-257.
2. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate, 2010. Ref Type: Catalog.

148