Page 349 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 18
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

nivel persistent normal sau discret crescut al ALT, în condiţiile unei replicări virale continue .
1
Pe de altă parte, detecţia prin amplificarea acizilor nucleici cu ajutorul reacţiei de polimerizare în lanţ
(PCR) oferă o măsură a replicării virale, fiind utilă atât pentru diagnosticul infecţiei active cât şi pentru
monitorizarea tratamentului. Noile teste care cuantifică încărcătura virală prin tehnologia ”real-time
PCR” au o sensibilitate analitică mai mare şi un domeniu de linearitate (măsurabil) mult extins, în
comparaţie cu tehnologia PCR conventională .
2;6
În ceea ce priveşte diagnosticul, folosind metoda PCR, este posibilă detecţia viremiei HCV înainte de
sero-conversia imunologică .
6
Protocolul de tratament al hepatitei cronice HCV include asocierea unui preparat de interferon pegylat
cu ribavirină, cuantificarea ARN-HCV fiind utilă pentru stabilirea viremiei bazale şi monitorizarea
încărcăturii virale în timpul tratamentului, având rol în evaluarea eficienţei terapiei şi identificarea
pacienţilor care nu vor beneficia probabil de continuarea tratamentului .
2;6
Specimen recoltat - sânge venos .
6
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant .
6
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
6
Cauze de respingere a probei - folosirea heparinei ca anticoagulant .
6
Prelucrare necesara după recoltare - se separă plasma în maxim 1 zi de la recoltare prin centrifugare
la 800-1600 x g timp de 20 de minute la temperatura camerei, apoi se transferă intr-o eprubetă de
polipropilen (sunt necesari min. 2mL de plasmă) 4
Stabilitate probă - plasma separată poate fi păstrată timp de 72 de ore la temperatura camerei, 7
zile la 2-8°C sau cel puţin 6 săptămâni congelată la -80°C. Probele pot fi congelate/decongelate de
maximum cinci ori fără pierderea ARN-ului HCV .
6
Metodă - Real-time PCR (TaqMan): reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a produsului
PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise.
Menţiune: procesarea probelor se face automat .
6
Valori de referinţă - ARN-HCV nedetectabil; limita de detecţie a metodei în domeniul de linearitate
este de 45 UI/mL; sensibilitatea analitică: 15 UI/mL. Un rezultat «nedetectabil» semnifică faptul că
este vorba fie de o viremie foarte scăzută (sub limita de cuantificare), fie de o viremie absentă .
6
Interpretarea rezultatelor
Obţinerea unui rezultat pozitiv indică prezenţa unei infecţii active.
Interferonul pegylat este indicat pentru tratamentul hepatitei cronice tip C la pacienţii adulţi cu
ARN-VHC pozitiv, precum şi la pacienţii cu ciroză hepatică compensată postinfecţie virală C. La
pacienţii cu hepatită cronică tip C, modul optim de folosire a interferonului pegylat este în asociere cu
ribavirina .
2;3
Ţinta tratamentului antiviral este răspunsul virusologic susţinut („sustained virusological
response”, SVR) definit ca ARN-HCV nedetectabil la 6 luni după încheierea tratamentului.
Răspunsul la tratamentul antiviral este influenţat de numeroşi factori, fie virologici (genotipul HCV,
nivelul viremiei bazale), fie care ţin de gazdă (rasă, severitatea afecţiunii hepatice, rezistenţa la
insulină). Alături de aceştia există şi factori corectabili, care au apărut în cursul terapiei iniţiale dar
asupra cărora se poate interveni la a doua încercare de tratment (reducerile mari de doze sau chiar
întreruperea tratamentului ca urmare a unor reacţii adverse hematologice sau a depresiei; complianţă

349