Page 385 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3
P. 385

GHIDUL  SERVICIILOR  MEDICALE                          18
                    AL  LABORATOARELOR  SYNEVO        TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ




        imunosupresoare (tacrolimus, mycophenolate mofetil) se descrie o tendinţă de creştere a prevalenţei
        PVAN .
             2;4
        Incidenţa viremiei şi viruriei BK scade semnificativ după 1 an de la transplant, cu reducerea riscului
        de reactivare.
        Alături de PVAN, BKV mai poate induce la pacienţii cu transplant renal stenoză uretrală (rata incidenţei
        este de 3%).
        Nu în ultimul rând, cea mai prevalentă complicaţie asociată cu BKV este cistita hemoragică care se
        dezvoltă la 10-25% dintre pacienţii cu transplant medular.
        În  majoritatea  cazurilor  viruria  BK  nu  se  asociază  cu  nefropatie  sau  cistită  hemoragică.  Acest
        lucru indică faptul că patogeneza BKV este rezultatul mai multor factori care includ: predispoziţia
        gazdei,  afectarea  organului-ţintă  şi  imunosupresia.  În  perioada  iniţială  post-transplant,  regimurile
        imunosupresoare severe constituie un trigger pentru reactivarea BKV în celulele renale; reactivarea
        conduce la infecţie productivă şi liza celulelor epiteliale renale.
        Manifestările clinice ale nefropatiei BKV sunt similare cu cele ale respingerii grefei, respectiv creşterea
        progresivă a nivelurilor de creatinină serică. Unii pacienţi pot prezenta febră şi hematurie .
                                                                       2
        Clasic  diagnosticul  de  nefropatie  BKV  necesită  demonstrarea  efectelor  citopatice  ale  virusului  în
        epiteliul tubular din ţesutul renal. Totuşi biopsia renală este asociată cu o rată de rezultate fals-negative
        de până la 30%, datorită naturii focale a bolii.
        Prezenţa celulelor cu nucleu mare şi cu un singur corp de incluzie bazofilic  (celule “momeală”) în
        probele de sediment urinar poate indica infecţia BKV. Cu toate acestea valoarea predictivă pozitivă
        a citologiei urinare este scăzută, modificările celulare nefiind caracteristice numai pentru BKV, ci şi
        pentru JCV şi adenovirusuri.
        Din aceste motive recomandările actuale prevăd ca în perioada posttransplant renal pacienţii să fie
        monitorizaţi prin tehnici PCR de detectare a BKV-ADN în urină şi sânge. Secvenţa ţintă este specifică
        pentru BKV; nu sunt posibile reacţii încrucişate cu JCV . Viruria clinic silenţioasă precede de obicei
                                               2;4
        PVAN, ceea ce permite identificarea pacienţilor cu risc şi instituirea de măsuri preventive (ajustarea
        dozelor de medicamente imunosupresoare) .
                                       1
        Recomandări pentru determinarea BKV - ADN - diagnosticul rapid al bolilor renale asociate cu
        BKV; monitorizarea pacienţilor cu transplant renal pentru depistarea precoce a nefropatiei în vederea
        reducerii dozelor de imunosupresoare .
                                   1;4
        Pregătire pacient - nu este necesară .
                                   3
        Specimen recoltat - a) o probă de urină spontană; b) sânge venos.
        Recipient de recoltare - a) eprubetă pentru urină; b) vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant
        Cantitate recoltată - a) minimum 2 mL; b) cât permite vacuumul .
                                                      3
         Prelucrare necesară după recoltare - probele nu vor fi centrifugate .
                                                         3
         Stabilitate probă - probele de urină şi sânge sunt stabile 48 ore la 2-4°C înainte de extracţia acizilor
         nucleici .
              3
        Metodă  -  Real-time  PCR  Light-Cycler:  reacţie  de  polimerizare  în  lanţ  cu  detecţie  în  timp  real  a
        produsului PCR  acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise (test calitativ) .
                                                              3
        Valori de referinţă - BKV - ADN nedetectabil .
                                        3
        Limita de detecţie - 10 copii/probă .
                                 3
                                                                           385
   380   381   382   383   384   385   386   387   388   389   390