Page 400 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

metodă alternativă de diagnostic este detectarea ADN-ului viral în ser sau plasmă înaintea apariţiei
anticorpilor, dar această metodă este mai puţin specifică decât seroconversia.
La persoanele imunocompromise este important să se facă diferenţa între infecţia latentă (fără
manifestări clinice) şi reactivare, lucru ce poate fi realizat prin determinarea ADN-ului viral în
plasmă .
2
Recomandări pentru determinarea HHV-6 - ADN - utilitate în diagnosticul rapid al infecţiilor cu
HHV-6 .
4
Pregătire pacient – nu este necesară .
3
Specimen recoltat – a) sânge venos; b) lichid cefalorahidian recoltat prin puncţie lombară .
3
Recipient de recoltare - a) vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant; b) recipient steril pentru
LCR .
3
Cantitate recoltată - a) cât permite vacuumul; b) minimum 2 mL . 3
Prelucrare necesară după recoltare - a), b) probele nu vor fi centrifugate .
3
Cauze de respingere a probei – a) probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea heparinei ca
anticoagulant . 3
Stabilitate probă - probele de sânge sau de LCR sunt stabile 48 ore la 2-4°C înainte de extracţia
acizilor nucleici .
3
Metodă - Real-time PCR Light-Cycler: reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a
produsului PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise (testul va fi efectuat din plasmă sau
LCR) .
3
Valori de referinţă – HHV-6 ADN nedetectabil .
3
Limita de detecţie - 10 copii/probă . 3
Interpretarea rezultatelor
Obţinerea unui rezultat pozitiv pentru HHV-6 ADN în plasmă, în prezenţa tabloului clinic, reprezintă
un indicator de infecţie activă.
Detectarea ADN-ului HHV-6 la nivelul lichidului cefalorahidian este sugestivă pentru o infecţie la
nivelul sistemului nervos central, dar nu are valoare diagnostică absolută (poate exista HHV-6 ADN
în LCR şi în cadrul altor afecţiuni SNC neasociate cu acest virus; de asemenea poate fi detectat şi la
pacienţi fără sindroame neurologice) 1;2;4 .
Limite şi interferenţe
Un rezultat negativ nu exclude infecţia cu HHV-6 .
4
Utilitatea testului PCR pentru diagnosticul infecţiilor cu HHV-6 este complicată de faptul că HHV-6 este
integrat în ADN-ul cromozomial la 0.7-1.5% din persoane. Celulele stem care conţin copii integrate
de HHV-6 transmit ADN viral primitorilor de transplant. Din acest motiv, dacă proba analizată conţine
leucocite este posibil să se obţină un rezultat pozitiv în absenţa unei infecţii active .
2
Bibliografie

1. Guy Boivin. Diagnosis of Herpesvirus Infections of the Central Nervous System. In HERPES 11,
Supplement, 2004.
2. Jeffrey I. Cohen Human Herpes Types 6 and 7. In Mandell, Douglas,and Bennett’s Principles and

400