Page 405 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 18
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

cavităţii de origine. Celulele maligne exprimă imunoglobuline clonale şi CD45 pe suprafaţă indicând
originea în limfocitele B, deşi antigenele specifice celulei lipsesc. Celulele tumorale infectate cu HHV-8
sunt frecvent coinfectate cu virusul Epstein-Barr.
Prognosticul este rezervat, decesul producându-se în câteva luni de la diagnostic .
1;2
Boala Castleman este o afecţiune limfoproliferativă rară, descrisă în 1956, ce se prezintă sub 2 forme:
localizată şi multicentrică. Forma localizată nu este asociată cu HHV-8. Virusul este asociat aproape
întotdeauna (80%) cu boala Castleman la pacienţii HIV pozitivi şi în circa 50% cazuri la persoanele
HIV negative. Celulele infectate cu HHV-8 sunt localizate în zona de manta a foliculului limfatic de
la nivelul ganglionilor. IL-6, interleukina care determină diferenţierea limfocitelor B în plasmocite, se
găseşte în concentraţii crescute în centrul germinativ al foliculului limfatic, explicând numărul mare de
plasmocite în ser.
Forma multicentrică se asociază cu febră, hepatosplenomegalie şi limfadenopatie generalizată, are o
evoluţie agresivă, frecvent fatală.
Diagnosticul pozitiv al unei infecţii cu HHV-8 poate fi demonstrat prin detectarea ADN-ului viral în
plasmă sau în celulele mononucleare din sângele periferic.
Recomandări pentru determinarea HHV-8 ADN - utilitate în diagnosticul infecţiilor cu HHV-8 . 3
Pregătire pacient - nu este necesară .
3
Specimen recoltat - sânge venos . 3
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant .
3
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
3
Prelucrare necesară după recoltare - proba nu va fi centrifugată .
3
Cauze de respingere a probei – probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea heparinei ca
anticoagulant .
3
Stabilitate probă - probele de sânge sunt stabile 48 ore la 2-4°C înainte de extracţia acizilor
nucleici .
3
Metodă - Real-time PCR Light-Cycler: reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a
produsului PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise .
3
Valori de referinţă - HHV-8 ADN nedetectabil . 3
Limita de detecţie - 10 copii/probă .
3
Interpretarea rezultatelor
Detectarea HHV-8 ADN în celulele mononucleare din sângele periferic la pacienţii HIV pozitivi fără
sarcom Kaposi este predictivă pentru dezvoltarea leziunilor ulterioare.
Viremia HHV-8 este mai mare la persoanele cu forme avansate de sarcom comparativ cu stadii
incipiente şi, de asemenea, valori ridicate se înregistrează la formele asociate cu HIV faţă de cele
clasice. Încărcătura virală din celulele mononucleare din sângele periferic este mai mică la bolnavii
cu sarcom în remisie faţă de cei cu boală activă. Deşi există corelaţie între viremie şi activitatea
bolii, folosirea acesteia pentru monitorizarea evoluţiei şi tratamentului sarcomului Kaposi este limitată
deoarece concentraţiile plasmatice sunt prea mici.
Pacienţii cu limfom au un nivel al viremiei mai ridicat decât cei cu sarcom Kaposi, dar mai scăzut decât
cei cu boală Castleman.
Încărcarea virală atât în plasmă, cât şi în celulele mononucleare din sângele periferic este la un nivel

405