Page 89 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 18
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

heterozigoţi au un risc de tromboză de 4-8 ori mai mare decât persoanele cu factor V normal, în timp
ce homozigoţii prezintă un risc de 80-100 ori mai mare .
5
Riscul creşte exponenţial la persoanele care asociază şi alţi factori de risc trombotic, cum ar
fi: coexistenţa altor defecte genetice (deficit de proteină C, S, antitrombină III, mutaţia genei
protrombinei, mutaţia genei care codifică metilentetrahidrofolat reductaza -MTHFR- şi se asociază cu
hiperhomocisteinemie), consumul de anticoncepţionale orale, sarcina .
5;6
Astfel, tromboza venoasă profundă şi tromboza sinusurilor cerebrale apar mai frecvent la pacientele
care iau anticoncepţionale orale, gravide sau aflate în perioada postpartum .
6
Middendorf şi colaboratorii săi au efectuat un studiu (2004) despre rolul factorului Leiden la pacienţii
cu infarct miocardic. Concluziile studiului au fost că pacienţii care prezintă mutaţia factorului V Leiden
au o predispoziţie pentru infarctul miocardic iar factorii tradiţionali de risc pentru boala coronariană ar
avea un rol mai puţin important la aceşti pacienţi .
2
În ceea ce priveşte complicaţiile sarcinii, prezenţa factorului V Leiden, ca şi cea a mutaţiilor genelor
protrombinei şi MTHFR, se asociază cu un risc crescut de pierderi recurente de sarcină, în special în
trimestrele II şi III .
1
Screening-ul membrilor asimptomatici în familiile la care s-a depistat mutaţia nu este recomandat pe
scară largă, datorită riscului scăzut de tromboze venoase letale. Cu toate acestea, investigarea poate
aduce beneficii în situaţiile în care se au în vedere sarcina sau administrarea de contraceptive orale,
la persoanele care au antecedente familiale de tromboze venoase recurente apărute la vârste < 50
ani. Persoanele care solicită testarea şi cele care obţin un rezultat pozitiv trebuie informate în legătură
cu implicaţiile diagnosticului şi cu semnele sau simptomele care necesită intervenţie medicală de
urgenţă .
2;6
Testul efectuat în laboratorul Synevo utilizează tehnica real-time PCR pe instrumentul LightCycler
pentru detecţia şi genotiparea mutaţei factorului V Leiden, la pacienţii cu suspiciune clinică de
trombofilie . 4
Specimen recoltat - sânge venos . 4
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant .
4
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
4
Cauze de respingere a probei - folosirea heparinei ca anticoagulant .
4
Stabilitate probă - 7 zile la 2-8ºC . 4
Metodă - Real-time PCR (LightCycler): reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a
produsului PCR acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise; la sfârşitul ciclurilor de amplificare se
efectuează genotiparea, prin analiza curbei de topire .
4
Interpretarea rezultatelor
Pentru un pacient, se raportează unul din cele 3 rezultate posibile:
- genotip sălbatic homozigot (negativ pentru mutaţia factorului V Leiden);
- genotip heterozigot (conţine o alelă sălbatică şi una mutantă pentru factorul V);
- genotip mutant homozigot (conţine ambele alele mutante) .
4
Limite şi interferenţe
La nivelul genei factorului V, pe lângă mutaţia factorului V Leiden în poziţia 1691, mai sunt posibile alte
3 mutaţii: 1692, 1689 şi 1696. La genotipare, aceste mutaţii rare vor conduce la un rezultat fals-pozitiv

89