Page 227 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 7
AL LABORATOARELOR SYNEVO TESTE DE HEMATOLOGIE

Naphthol AS-D cloracetat esteraza este prezentă în celulele liniei granulocitare şi se găseşte în
cantitate mică sau este absentă în monocite şi precursorii monocitelor.
Esteraza nespecifică este, aşa cum îi arată şi numele, o enzimă ubiquitară prezentă în mai multe
tipuri de celule, printre care: monocite, celule T şi megacariocite. Poate utiliza ca substraturi: alfa-naftil
acetat, alfa-naftil butirat, naftol AS- D acetat .
4
Principiul metodei
Ne vom referi la reacţia alfa-naftil acetat esterază (ANAE): alfa-naftil acetatul este hidrolizat de
esteraze în alfa-naftol, care în prezenţa unei sări de diazoniu formează un compus de culoare roşu-
brun, insolubil în apă .
1;3
Recomandări pentru determinarea esterazelor nespecifice
- diagnosticul LA monocitare tipurile M4 şi M5 .
1
Pregătire pacient - à jeun (pe nemâncate) sau postprandial (după mese) . 3
Specimen recoltat
a) sânge capilar şi/sau aspirat medular - frotiuri
b) se recomandă recoltarea simultană de sânge venos pentru hemogramă .
3
Cauze de respingerea probei
- frotiuri nefixate în maxim 8 ore de la recoltare;
- frotiuri executate din sânge recoltat pe EDTA . 3
Recipient de recoltare
a) se execută frotiuri de sânge capilar direct pe lame de microscopie;
b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemogramă .
3
Cantitate recoltată
a) 3-5 frotiuri;
b) 2 mL .
3
Prelucrare necesară după recoltare
Este preferabil ca fixarea frotiurilor să se facă în primele 30 minute de la recoltare. Eventual, se
poate face în primele 8 ore. Amestec fixator: alcool etilic 9 părţi + formol 40% 1 parte. Fixarea se
cronometrează 30 secunde, după care frotiurile se spală cu jet de apă de robinet. Frotiurile fixate se
pot colora imediat sau se pot păstra câteva zile la temperatura camerei, până la colorare .
3
Stabilitate probă
- frotiurile nefixate sunt stabile maxim 8 ore la 18-30ºC;
- frotiurile fixate sunt stabile 5 zile la temperatura camerei . 3
Metodă - examinare microscopică . 3
Interpretarea rezultatelor
În monocite, activitatea enzimatică a ANAE se evidenţiază prin apariţia unui compus roşu-brun, cu
aspect difuz, moderat sau intens colorat (tip M –monocitar). În celulele T (inclusiv limfoblaştii T) şi
megacarioblaşti, aspectul este mai mult focal, în regiunea Golgi sau paranuclear. Aspectul colorării
este util, într-o anumită măsură, în diferenţierea tipurilor de celule.
Etapa de inhibare cu NaF a fost adăugată pentru a face esteraza nespecifică „mai specifică”.
Activitatea enzimei în celulele liniei monocitare este inhibată de NaF, în timp ce în restul celulelor
activitatea persistă.
Alfa-naftil acetat esteraza este obişnuit negativă în celulele de serie granulocitară. Celulele blastice

227