Page 224 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

7 TESTE DE HEMATOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

a) sânge capilar şi/sau aspirat medular - frotiuri
b) se recomandă recoltarea simultană de sânge venos pentru hemogramă . 3
Cauze de respingerea probei
- frotiuri nefixate în maxim 8 ore de la recoltare;
- frotiuri executate din sânge recoltat pe EDTA .
3
Recipient de recoltare
a) se execută frotiuri de sânge capilar direct pe lame de microscopie;
b) vacutainer cu EDTA K3 (capac mov), pentru hemogramă .
3
Cantitate recoltată
a) 3-5 frotiuri;
b) 2 mL .
3
Prelucrare necesară după recoltare
Este preferabil ca fixarea frotiurilor să se facă în primele 30 minute de la recoltare. Eventual, se
poate face în primele 8 ore. Amestec fixator: alcool etilic 9 părţi + formol 40% 1 parte. Fixarea se
cronometrează 30 secunde, după care frotiurile se spală cu jet de apă de robinet. Frotiurile fixate se
pot colora imediat sau se pot păstra câteva zile la temperatura camerei, până la colorare . 3
Stabilitate probă
- frotiurile nefixate sunt stabile maxim 8 ore la 18-30ºC;
- frotiurile fixate sunt stabile 5 zile la temperatura camerei .
3
Metodă - examinare microscopică .
3
Interpretarea rezultatelor
Granulele de culoare galben-brună indică prezenţa activităţii peroxidazelor celulare.
Reacţia este intensă în celulele seriei granulocitare. Martorul pozitiv al reacţiei este reprezentat de
granulocitul matur - granule mari în citoplasmă şi peste nucleu. Este discutabil dacă mieloblastul
normal este peroxidazo-pozitiv în microscopia optică. Reacţia este pozitivă începând de la stadiul
de promielocit; sunt prezente o multitudine de granule galben-brune în citoplasmă, care uneori
maschează alte caracteristici citoplasmatice.
Pentru stabilirea diagnosticului de leucemie acută mieloblastică (LAM) cel puţin 3% din blaşti trebuie
să fie peroxidazo-pozitivi. Mieloblaştii prezintă de obicei granulele mari, localizate şi mai reduse
numeric decât promielocitele normale. Corpii Auer, rezultaţi din coalescenţa anormală a granulaţiilor
azurofile, sunt intens peroxidazo-pozitivi.
Monocitele dau o reacţie negativă sau slab pozitivă. Monoblaştii din leucemia acută monocitară (LAM-
M5) sunt de obicei negativi, în timp ce monoblaştii din leucemia acută mielomonocitară (LAM-M4) pot
fi slab pozitivi.
Limfocitele şi eritrocitele nu au activitate MPO în nici un stadiu de maturare.
În concluzie, reactia pozitivă în blaşti indică leucemie mieloblastică sau mielomonocitară 1;4;5 .
Limite şi interferenţe
Obţinerea unei reacţii pozitive în blaşti are valoare diagnostică pentru leucemia acută mieloblastică, în
timp ce reacţia negativă este neconcludentă. Rezultatul trebuie coroborat cu alte teste citochimice .
1

224