Page 306 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

7 TESTE DE HEMATOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

detectarea LA) şi un test aPTT ce foloseşte silica ca activator şi are un conţinut scăzut de
fosfolipide (al doilea test ca sensibilitate după dRVVT); dacă se obţine un rezultat pozitiv la
unul din cele două teste se trece la etapele de mai jos;
C) amestecul plasmă normală + plasmă de pacient („mixing test”): se efectuează un amestec
1:1 de plasmă normală + plasmă de pacient, fără preincubare, timp de 30 minute; plasma
normală poate fi obţinută in house de la donatori sănătoşi sau se poate utiliza plasmă
comercială liofilizată sau congelată; rezultatul testului este sugestiv pentru LA dacă timpul
de coagulare al amestecului de plasmă este mai mare decât valoarea cut-off stabilită pentru
plasma normală; amestecul corectează timpii de coagulare în cazul deficitului de factorii
plasmatici; ideal se va efectua şi un timp de trombină pentru a identifica prezenţa heparinei
şi inhibitorilor specifici ai factorilor coagulării; testul nu va putea fi efectuat dacă plasma este
incoagulabilă.
D) testele de confirmare – utilizează reactivi cu un conţinut ridicat de fosfolipide (fosfolipide
în bistrat sau în fază hexagonală); se testează proba pacientului cu reactivul ce are
concentraţie ridicată de fosfolipide (confirmare) şi se compară rezultatul obţinut cu cel de
la etapa de screening (în prezenţa unui reactiv cu un conţinut scăzut în fosfolipide); se
calculează corecţia procentuală [(screen – confirm) / screen] x 100, fie raportul LA (screen/
confirm) şi se interpretează în raport cu valorile cut-off stabilite pentru plasma normală.
E) raportarea rezultatelor – se va face cantitativ cu un comentariu care să indice dacă
rezultatele sunt compatibile cu un rezultat pozitiv sau negativ .
4
Pregătire pacient – ideal, proba trebuie să fie recoltată înaintea iniţierii tratamentului anticoagulant .
1
Specimen recoltat - sânge venos .
1
Recipient de recoltă - vacutainer cu citrat Na 0.105 M (1/9), capac bleu/verde . 1
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
1
Cauze de respingere a probei - probă în cantitate inadecvată (sub nivelul indicat pe vacutainer);
specimen hemolizat; prezenţă de coaguli în probă .
1
Prelucrare necesară după recoltare - centrifugare 15 min la 2500 g pentru obţinerea plasmei
(plasma trebuie să fie foarte săracă în trombocite, T <10000/μL – dublă centrifugare), urmată imediat
de separarea plasmei şi congelarea acesteia; probele recoltate în afara laboratorului vor fi transportate
în recipientul destinat probelor congelate .
1;2
Stabilitate probă – plasma separată este stabilă 4 ore la temperatura camerei;1 lună la -20°C .
1
Metode
Screening: dRVVT screen + aPTT-LA (aPTT sensibil pentru LA); dacă rezultatul este negativ la
ambele teste, LA va fi comunicat negativ; dacă se obţine un rezultat pozitiv la unul sau ambele teste,
se va recurge la „mixing test” şi la testele de confirmare.
Confirmare: dacă aPTT-LA este pozitiv se va efectua testul de neutralizare cu fosfolipide în fază
hexagonală; dacă dRVVT screen este pozitiv se va efectua dRVVT confirm.
Valori de referinţă - anticoagulant lupic negativ .
1
Menţiune: Pentru diagnosticul de sindrom antifosfolipidic sunt semnificative 2 rezultate pozitive
obţinute la interval de 12 săptămâni 1;2;3 .
Limite şi interferenţe
Rezultatele obţinute pe probe recoltate în cursul unui episod trombotic acut trebuie interpretate cu
prudenţă deoarece pacienţii se află sub tratment anticoagulant de atac, iar reactanţii de fază acută (de
exemplu, FVIII) pot înregistra valori crescute . La pacienţii aflaţi în tratament cu preparate de heparină
4
306