Page 357 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3
P. 357

GHIDUL  SERVICIILOR  MEDICALE                          18
                    AL  LABORATOARELOR  SYNEVO        TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ




        sensibilitate de 25-40% a testului în primele săptămâni de viaţă, care creşte la 90-100% până la
        vârsta de 2-3 luni) ; 3
        ●   monitorizarea evoluţiei bolii (în prezenţa sau în absenţa terapiei antiretrovirale);
        ●    evaluarea  eficacităţii  diferitelor  tratamente  antivirale:  înaintea  iniţierii  terapiei  (valori  bazale),
        monitorizare indirectă pentru detectarea unei posibile rezistenţe antiretrovirale, lipsa complianţei la
        tratament .
               6
        Avantajele testului
                    -   sensibilitate şi specificitate comparabile cu izolarea virusului;
                    -   utilizarea unor cantităţi mici de probe de testat;
                    -   testul este rapid şi se observă un paralelism cert între încărcătura virală
                       plasmatică sau celulară, depleţia de celule T CD4 şi progresia bolii, elemente
                       ce trebuie luate în considerare la aplicarea tratamentului .
                                                               7
        Pregătire pacient - nu este necesară .
                                   4
        Specimen recoltat - sânge venos . 4
        Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant ;
                                                          4
        Cantitate recoltată - cât permite vacuumul ;
                                       4
         Prelucrare necesară după recoltare - proba nu va fi centrifugată . 4
         Cauze  de  respingere  a  probei  -  probe  vechi,  coagulate,  hemolizate;  folosirea  heparinei  ca
         anticoagulant .
                  4
         Stabilitate  probă  -  probele  de  sânge  sunt  stabile  48  ore  la  2-4°C  înainte  de  extracţia  acizilor
         nucleici .
              4
        Metodă – Real-time PCR (TaqMan): reacţie de polimerizare în lanţ cu detecţie în timp real a produsului
        PCR  acumulat, prin măsurarea fluorescenţei emise (test cantitativ). 4
        Valori de referinţă - HIV-1ARN: nedetectabil .
                                        4
        Limita de detecţie - 20 copii/mL .
                               4
         Interpretarea rezultatelor
        Un rezultat nedetectabil indică faptul că testul nu a detectat HIV-1 ARN în proba analizată. Un rezultat
        având comentariul „HIV-1 ARN detectabil, dar <20 copii/mL” indică faptul că a fost detectat HIV-1
        ARN în probă, dar nivelul său se află sub limita inferioară de detecţie a metodei; acest rezultat se
        poate datora unei viremii foarte mici, unei infecţii HIV1 în stadiu precoce (<3 săptămâni de la contactul
        infectant) sau a unei false pozitivităţi (datorate unei imprecizii a testului în absenţa infecţiei) . 6
        În cazul copiilor născuţi din mame HIV pozitive rezultatele vor fi interpretate astfel:
                    -   obţinerea a două valori negative pentru HIV1-ARN la vârsta de minimum 1 lună
                       şi respectiv la 4 luni (sau mai mult) infirmă infecţia;
                    -   obţinerea a două valori pozitive pentru HIV1-ARN la vârsta de minimum 1 lună
                       şi respectiv la 4 luni (sau mai mult) confirmă infecţia .
                                                            3
        Limite şi interferenţe
         Nu se recomandă stabilirea unor decizii terapeutice pe baza unei singure valori a viremiei. Rezultatele
         viremiei  trebuie  interpretate  întotdeauna  în  contextul  clinic  şi  corelate  cu  numărul  celulelor  CD4
         pozitive . 6
         Variaţiile diurne ale HIV ARN sunt mai mari la copii comparativ cu adulţii; din acest motiv numai


                                                                           357
   352   353   354   355   356   357   358   359   360   361   362